MKS001等四种药物体外抑制HBV的实验研究

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目的:研究MKS001、XSJ002、MGS003、NKD004四种药物体外对乙型肝炎病毒的抑制作用,为乙型肝炎病毒的治疗及治疗机制提供新的探索思路和途径。方法:HepG2.2.15细胞是由HBV全基因组转染人肝癌细胞株得到的可以在体外稳定的、高水平表达HBsAg、HBeAg及完整的HBV颗粒的细胞株。通过体外培养HepG2.2.15细胞,向细胞培养液中分别加入上述四种不同浓度的药物,观察每种药物在不同浓度下的细胞病变程度,并利用CCK-8法检测药物对细胞的毒性作用。在最大无毒性浓度下,将上述四种药物再配置成不同浓度,然后分别加入HepG2.2.15细胞中培养72h后收集细胞培养液,用ELISA法检测细胞培养液中HBsAg和HBeAg,用荧光定量PCR法检测细胞培养液中HBVDNA载量。采用SPSS16.0软件系统中的t检验进行统计学分析,计量资料以均数±标准差(X±S)表示。P<0.05具有统计学意义。结果:MKS001、XSJ002、MGS003在体外均有抑制HBV的作用。MKS001的最大无毒性浓度(TC0)为1umol/L,此时对HepG2.2.15细胞体外分泌的HBsAg的抑制率为59.96%(P<0.01),对HBe Ag的抑制率为35.17%(P<0.01),对HBVDNA复制的抑制率为60.00%(P<0.01);XSJ002的最大无毒性浓度(TC0)为0.01umol/L,此时对HepG2.2.15细胞体外分泌的HBsAg的抑制率为27.12%(P<0.01),对HBeAg的抑制率为33.93%(P<0.01),对HBVDNA复制的抑制率为46.47%(P<0.01);MGS003的最大无毒性浓度(TC0)为0.01umol/L,此时对HepG2.2.15细胞体外分泌的HBsAg的抑制率为25.46%(P<0.01),对HBe Ag的抑制率为31.43%(P<0.01),对HBVDNA复制的抑制率为29.17%(P<0.01);NKD004则在所选的药物浓度范围内均未发现体外对HBsAg、HBe Ag和HBVDNA有抑制性。结论:1、MKS001、XSJ002、MGS003体外均有抑制HBV作用,NKD004体外未发现抗HBV作用。2、MKS001、XSJ002、MGS003三种药物对HBV的抑制强度均随药物浓度的增大而增加,体现出明显的药物剂量依赖性。
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