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背景:目前我国子宫内膜癌（Endometrial carcinoma,EC）发病率在妇科恶性肿瘤中位居第二,严重威胁广大妇女身体健康。尽管其发病人群仍以围绝经期和绝经后妇女为主,但近年来年轻妇女发病率逐年增加,最新版NCCN《子宫肿瘤临床实践指南中》特别指出了子宫内膜样腺癌保留生育功能的指征和方法,警示临床医生要特别重视有生育需求子宫内膜癌患者的治疗问题。虽然子宫内膜癌的治疗方法在不断更新与完善,但对其发病机制进行不断探究,寻求更为有效的非手术治疗仍十分必要。辣椒素（capsaicin,CAP）化学名称为:反式-8-甲基-N-香草基-6-壬烯基酰胺,是辣椒属植物中的主要辛辣成分。既往已有大量研究表明其在多个学科领域有临床应用前景,如疼痛、呼吸系统、心血管系统、泌尿系统、胃肠道、肿瘤、肥胖等[1]。近年来其在抗肿瘤方面的研究备受学术界关注。瞬时受体电位香草酸亚型1（transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1）为辣椒素受体,在多种肿瘤细胞中,辣椒素的促凋亡作用为TRPV1依赖性的[2,3]。本课题组的前期研究表明Ⅰ型子宫内膜癌的发生发展可能有TRPV1参与,Ⅱ型子宫内膜癌的发生可能与TRPV1的丢失有关,且I型子宫内膜癌的代表细胞株ISHIKAWA中TRPV1呈阳性表达[4]。目的:探究辣椒素通过TRPV1通路对人子宫内膜癌ISHIKAWA细胞增殖、凋亡和周期的影响及其相关分子机制,以期为ISHIKAWA细胞代表的I型子宫内膜癌寻求非手术治疗新方法。方法:1.细胞培养将雌激素受体（ER）阳性表达的人子宫内膜癌ISHIKAWA细胞株以含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,置于37℃、5%CO2的饱和湿度培养箱中。2.实验分组不同浓度的辣椒素（0、50、100、200、400μmol/L）处理ISHIKAWA细胞24小时,并另设一组实验组为10μM辣椒平（capsazepine,CPZ）预处理ISHIKAWA细胞30min,再用200μM CAP处理ISHIKAWA细胞24小时。3.细胞增殖实验MTT法检测按实验分组处理过的ISHIKAWA细胞的体外增殖情况。4.细胞形态学观察通过明场照片和双苯并咪染料（Hoechst 33342）活细胞吸收分析法观察不同分组细胞形态学变化。5.流式细胞检测分析使用流式细胞仪进行不同实验分组细胞的凋亡检测和周期检测。6.蛋白免疫印记法（Western Blot）检测不同实验分组细胞抑癌基因p53、凋亡蛋白caspase-3和周期相关蛋白CDK2的表达情况。7.统计分析数据采用SPSS19.0软件进行统计学处理。计量资料以均数±标准差（x±s）表示,计数资料以n%（N/N）表示,检验水准α=0.05。细胞增殖率数据符合正态分布,但方差不齐,采用多个独立样本的非参数检验。流式细胞术检测数据符合正态分布及方差齐性检验,采用单因素方差分析。结果:1.辣椒素对子宫内膜癌ISHIKAWA细胞增殖活性的影响:随着辣椒素刺激浓度的增高,细胞增殖率呈剂量依赖性下调,且TRPV1受体拮抗剂CPZ可减弱这种作用。2.辣椒素对子宫内膜癌ISHIKAWA细胞形态学影响:明场照片显示与对照组相比,ISHIKAWA细胞表现为随着药物浓度的增加细胞数量减少,细胞皱缩程度加深,贴壁性变差,甚至出现大量碎裂细胞。Hoechst33342染色后ISHIKAWA细胞均表现为随着药物浓度的增加,细胞核染色加深、缩小,染色质固缩凝集,重者细胞核碎裂,呈现大小不等的致密浓染的颗粒状荧光。且以上由CAP引起细胞形态学变化趋势均可被CPZ部分逆转。3.辣椒素对子宫内膜癌ISHIKAWA细胞凋亡率的影响:随着药物浓度的增加,ISHIKAWA细胞的凋亡率表现为浓度依赖性增加,且这种趋势可被CPZ逆转。4.辣椒素对子宫内膜癌ISHIKAWA细胞细胞周期的影响:随着药物浓度的增加,ISHIKAWA细胞的S期细胞百分比呈浓度依赖性增加,这种趋势可被CPZ逆转。5.辣椒素处理ISHIKAWA细胞后相关蛋白的表达情况:与对照组相比,ISHIKAWA细胞经CAP处理后cleaved caspase-3蛋白和p53蛋白表达明显上调,CDK2蛋白表达明显下调,而CAP+10μM CPZ组则对CAP引起的蛋白表达量的变化有反向调节的作用。结论:1.体外实验表明辣椒素可诱导ISHIKAWA细胞产生增殖抑制和凋亡促进作用,并可诱导其发生S期阻滞。2.辣椒素对ISHIKAWA细胞的生长抑制作用为TRPV1依赖性,且可能和抑癌基因p53、凋亡蛋白caspase-3的上调以及周期相关蛋白CDK2的下调相关。