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2002-2003年暴发的SARS是由一类新型冠状病毒引起的高致死率的呼吸道疾病,在随后的SARS冠状病毒溯源中又发现一类与SARS冠状病毒在基因组上有很高的相似性的冠状病毒,命名为SARS样冠状病毒(SL-CoV)。本论文对SARS-CoV及SL-CoV S蛋白的免疫学特性和细胞受体CD209进行了初步的研究。结果如下:
1.分别构建了含有SARS-CoV S基因、SL-CoV S基因以及二者的嵌合体(即含有SARS-CoV S的受体结合区域RBD的SL-CoV S基因)的瞬时表达载体,免疫小鼠,检测不同S蛋白引起的免疫应答水平。结果证明SL-CoV S相应的RBD区域的免疫原性与SARS-CoV S RBD具有较大差异,两者之间仅存在的微弱的交叉反应。中和实验说明SL-CoV S318-510区域不能产生针对于SARS-CoV的中和抗体。
2.利用RT-PCR的方法得到小蹄蝠(Hipposideros cineraceus)CD209的同源基因,命名为hcCD209,并对该基因进行序列比对和系统进化分析。结果发现来自该种蝙蝠的CD209与恒河猴CD209L2的相似性为70%,与人CD209和CD209L的相似性分别为41%和46%。其中相似性最高的为C端的糖基识别区域(CDR)。对于这段区域,hcCD209与人和灵长类同源基因的相似性达82-84%。系统进化分析表明hcCD209属于CD209家族,在进化上与人的关系更近。本文同时对hcCD209的CDR进行原核表达,制备了兔抗hcCD209 CDR的多克隆抗体,构建了稳定表达huCD209和hcCD209的稳定表达细胞系,命名为HeLa-huCD209和HeLa-hcCD209,为后续研究CD209与SARS-CoV S及SL-CoVS之间的相互作用奠定了基础。