基于LMD-LC-MS/MS技术的博落回根中生物碱的组织化学研究

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a341104361
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本研究基于激光显微切割结合荧光显微技术,同时应用LC-MS/MS对不同生长时期的博落回主、侧根中生物碱进行了组织化学研究。利用荧光显微技术对不同样本组织(包括木栓层、皮层、韧皮部、木质部维管束及木射线等)准确辨识,采用激光对其精确切割。UHPLC-Q/TOF MS技术定性分析各切割组织。最终,推测了49个生物碱,其中13个通过与标准品比对得以确认,24个首次在博落回中报道。结合其他植物中已有的异喹啉生物碱代谢途径对博落回根中推断的生物碱进行了可能的生源合成演绎,血根碱和白屈菜红碱的生源合成途径可能存在于博落回根中。将49个化合物对组织样品进行表征分布研究,结果显示:嫩根组织中生物碱的数目少于老根的相应组织;侧根木栓层所含生物碱数目略多于主根;木栓层和木质部维管束中所含生物碱的个数多于其他组织,且木栓层中特征性的化学成分主要为疏水性生物碱(苯并菲啶类和二氢苯并菲啶类)。在组织中生物碱定性分析的基础上,进一步利用UHPLC-QqQ MS技术对其中的原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱、二氢白屈菜红碱及二氢血根碱进行含量检测,结果表明:嫩根组织中六种生物碱的含量均少于老根的相应组织,但嫩根中血根碱和白屈菜红碱含量在六种生物碱总量中所占的比例大于老根;侧根木栓层所含六种生物碱的量多于主根;木栓层和木质部维管束中六种生物碱的含量多于其他组织。因此,基于该方法的组织化学研究具有高空间分辨率、专属性强、灵敏度高及准确可靠的特点。本研究推测的生物碱及其组织分布与积累规律为博落回根中生物碱的合成、转运和贮存机制阐明提供了基础,且对原植物材料品质评估及其合理采收也具有重要意义。
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