8—氯—腺苷(8—Cl—Ado)是一种腺嘌呤核苷类似物。研究表明，它对包括实体瘤和血液系统恶性瘤在内的多种肿瘤细胞具有增殖抑制作用。我们以往的研究证明8—Cl—Ado可通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制肿瘤细胞生长，但其作用机制目前尚不太清楚。 本研究以人非小细胞性肺癌A549和H1299细胞为研究对象，首先用MTT实验证明8—Cl—Ado可抑制肿瘤细胞生长。进而用彗星电泳法(Comet assay)证明8—Cl—Ado可引起DNA链断裂损伤。当DNA发生双链断裂(DSBs)时，断端处的一种组蛋白H2A异构体—H2AX将在其139位丝氨酸上发生磷酸化(被称为γ—H2AX)，可用来指示DSBs发生。γ—H2AX在断裂点的聚集可招募细胞周期检验点分子及损伤修复因子。我们采用γ—H2AX特异抗体进行免疫荧光分析，结果发现8—Cl—Ado可使A549和H1299细胞核中γ—H2AX焦点(Foci)增多，说明8—Cl—Ado确实可引起DSBs损伤。Western blotting也进一步证明，8—Cl—Ado处理后γ—H2AX蛋白水平升高。接下来，我们采用5—溴—脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)参入结合流式细胞分析技术检测DNA合成情况，结果发现8—Cl—Ado可抑制S期细胞的DNA合成。因此，8—Cl—Ado引起DSBs、影响DNA合成可能是8—Cl—Ado抑制肿瘤细胞生长的原因之一。此外，拓扑异构酶Ⅱ(TopoismeraseⅡ，TopoⅡ)是一种真核生物生存所必需的泛酶，在DNA复制及其它与DNA代谢有关的过程中都发挥重要作用。目前，TopoⅡ已成为众多抗肿瘤药物的靶点。本实验中，我们对TopoⅡ的活性进行分析，结果发现8—Cl—Ado可不同程度的抑制TopoⅡ的活性。 综上，我们认为8—Cl—Ado可抑制TopoⅡ活性，引起肿瘤细胞DNA双链断裂，影响DNA合成，从而抑制肿瘤细胞生长。