BALB/c小鼠间变性大细胞淋巴瘤模型的建立及体液免疫机制探讨

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目的:构建BALB/c小鼠间变性大细胞淋巴瘤的动物肿瘤模型,并初步探讨其体液免疫功能的作用。方法:①培养人间变性大细胞淋巴瘤细胞株Karpas-299,将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、环磷酰胺对照组、移植组;②环磷酰胺对照组及移植组BALB/c小鼠注射环磷酰胺(250mg/kg/只)预处理;③移植组小鼠在环磷酰胺预处理3天后将ALCL细胞悬液经皮下注射到体内,建立ALCL小鼠肿瘤模型,观察小鼠成瘤情况,根据成瘤情况分为移植未成瘤组及移植成瘤组;④处理后24天后取肿瘤组织进行常规HE染色及免疫组织化学染色鉴定以及取各组小鼠外周血行ELISA分析IL-2、IL-4、IgM、TNF-β、TGF-β、sCD30细胞因子的变化情况。结果:1.环磷酰胺预处理后,小鼠存活率100%,移植细胞后存活小鼠成瘤率80%;2.肿瘤组织行HE染色,病理组织学结果为恶性淋巴瘤。其特点为:肿瘤细胞形态多样化,体积较大,胞浆丰富,核仁明显浅染、偏心,呈马蹄形、卷曲不规则,可见细胞核分裂象,部分肿瘤组织伴有坏死。免疫表型特点:CD30、 ALK阳性,CD20阴性,染色结果符合间变性大细胞淋巴瘤免疫表型。3. ELISA检测:①与空白组相比:环磷酰胺对照组TNF-β含量降低(P<0.05),余指标无差异(P>0.05)。移植未成瘤组IL-2、TNF-β,sCD30、IgM含量升高(P<0.05),IL-4、TGF-β含量无差异(P>0.05),移植成瘤组IL-2含量降低(P<0.05),余指标升高(P<0.05);②与CTX24组相比:IL-2、TNF-β含量升高(P<0.05),IL-4、IgM、TGF-β、sCD30含量无差异(P>0.05);移植成瘤组IL-2含量降低(P<0.05),余指标含量升高(P<0.05);③与移植组未成瘤相比:移植成瘤组小鼠IL-2含量降低(P<0.05),余指标含量均增高(P<0.05)。结论:1.在具有正常免疫功能的小鼠上成功构建了ALCL肿瘤模型;2.对BALB/c小鼠给予免疫抑制剂药物环磷酰胺的预处理,使得小鼠机体产生免疫耐受,为后续移植ALCL肿瘤细胞后肿瘤的发生发展提供了优势基础条件。3.通过正常组、环磷酰胺对照组、移植成瘤组小鼠相关细胞因子检测结果分析:肿瘤构建过程中,肿瘤细胞可能通过诱导提高免疫抑制细胞因子TNF-β,sCD30、IL-4、TGF-β表达,降低免疫细胞因子IL-2表达,达到抑制机体抗肿瘤效应,躲避免疫攻击,从而促进肿瘤生长、侵润。
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