利用双T-DNA载体系统获得无选择标记转基因植物的研究

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该实验由部分组成:1,采用携带质粒pDLBRBbarm的单一根癌农杆菌LBA4404和携带有质粒pCDMARGUS-NPT-Ⅱ的单一根癌农杆菌LBA4404分别转化模式植物烟草(NicotianatabacumL.)(Xanthi).质粒pDLBRBbarm含有两个T-DNA区域,分别包含选择标记nptⅡ基因和作为目的基因看待的抗除草剂基因bar;质粒pCDMARGUS-NPTⅡ含有两个T-DNA区域,分别包含选择标记nptⅡ基因和作为目的基因看待的报告基因β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,gus)基因(uidA).以选择标记nptⅡ基因作为筛选标记,在获得的转化植株中,检测另外一种基因bar或gus的存在情况.2,采用携带有质粒pCNPTⅡ和携带有质粒pCMasBarm的根癌农杆菌混合菌液共同转化烟草,质粒pCNPT-Ⅱ的T-DNA区域上有选择标记nptⅡ基因,质粒pCMasBarm上有目的基因bar,共转化频率为20﹪~58﹪,低于使用双T-DNA转化的共转化频率.该实验说明利用双T-DNA载体系统获得无选择标记基因的转基因植物是可行的.
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