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目的:
本研究使用导师周荣耀教授的临床经验方--补肾健脾方,①观察该方对证属肾阴虚兼脾气虚的原发性肝癌(以下简称肝癌)术后患者甲状腺激素水平及临床疗效的影响;②观察该方对肝癌H22移植瘤小鼠的肿瘤抑制,免疫增强作用;⑨观察该方药物血清对人肝癌细胞株HepG2的抑制增殖,促进凋亡作用。从临床和实验研究二方面,探讨补肾健脾方治疗原发性肝癌的机理。
方法:
1:将临床收集的45例肝癌术后证属肾阴虚兼脾气虚,同时伴有甲状腺激素水平降低的肝癌患者,随机分为补肾健脾方治疗组和对症处理的对照组,分别予补肾健脾方口服治疗,和临床对症处理治疗。观察二组患者治疗前后甲状腺激素水平的变化,中医临床证侯积分、卡氏生活质量评分、甲胎蛋白、肿瘤病灶的变化,及该方对患者生存期的影响。
2:建立肝癌H22移植瘤小鼠模型。予补肾健脾方治疗,并设立5-氟脲嘧啶(以下简称5-FU)组、补肾健脾方中药+5-FU组。检测各组治疗后的肿瘤抑制率、小鼠体重、脾指数、脾脏NK细胞活性、脾脏淋巴细胞增殖活性、脾脏淋巴细胞亚群,进行比较分析。
3:使用人肝癌细胞株HepG2,运用中药血清药理学方法,制备补肾健脾方药物血清,培养HepG2细胞。并设立5-FU血清组、补肾健脾方+5-FU血清组。观察各组肿瘤细胞增殖情况、肿瘤细胞的细胞增殖周期、及细胞凋亡率,并检测凋亡相关基因p53、Caspase-3,进行比较分析。
结果:
1:补肾健脾方能提高肝癌术后证属肾阴虚兼脾气虚,同时伴有甲状腺激素水平降低的患者的甲状腺激素T3、T4水平,治疗前后比较有统计学差异;与对照组比较同样存在统计学差异。同时该方能改善患者中医临床证侯积分、卡氏生活质量评分,延长患者的生存期,但对患者甲胎蛋白及肿瘤病灶无明显影响。
2:补肾健脾方能抑制肝癌H22移植瘤小鼠肿瘤的生长,增强小鼠免疫功能,增加小鼠体重等用。当该方与化疗药物5-FU合用时,可明显提高肿瘤抑制率,改善被5-FU抑制的免疫功能。与单用5-FU组之间比较,三组之间存在统计学差异。
3:补肾健脾方药物血清对人肝癌细胞株HepG2具有抑制增殖作用,可使肿瘤细胞增殖停滞在细胞周期的G0/G1期,同时可明显促进肿瘤细胞凋亡。补肾健脾方+5-FU合用药物血清组的抑制作用进一步加强。与单用5-FU药物血清组之间比较,三组之间存在统计学差异。同时发现补肾健脾方药物血清对肿瘤细胞凋亡相关基因p53、caspase-3的表达有一定的提高作用。
结论:
1:补肾健脾方可提高证属肾阴虚兼脾气虚肝癌术后患者降低的甲状腺激素水平,并能改善患者症状,提高患者生活质量,延长患者生存期。
2:补肾健脾方可抑制肝癌H22移植瘤小鼠的肿瘤生长,提高小鼠的免疫功能。
3:补肾健脾方药物血清可抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖,促进细胞凋亡,提高凋亡相关基因p53、caspase-3的表达水平。
4:当补肾健脾方与化疗药物5-FU联合使用时,可缓解5-FU对免疫功能的抑制作用,并能提高5-FU的对肿瘤的抑制作用,起到一定的减毒和增效作用。