【摘 要】
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目的:1.检测膀胱癌组织及细胞系中CircPGM5的表达量;2.探究过表达CircPGM5对膀胱癌细胞增殖能力的影响;3.探究过表达CircPGM5对膀胱癌细胞迁移功能的影响。方法:1.通过琼脂糖凝胶电泳实验验证circPGM5是否为环状RNA;2.通过实时定量PCR(QPCR)技术检测膀胱癌组织及细胞系中CircPGM5的表达量;3.用慢病毒方法稳定转染膀胱癌细胞,并通过QPCR技术检测出感染效
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目的:1.检测膀胱癌组织及细胞系中CircPGM5的表达量;2.探究过表达CircPGM5对膀胱癌细胞增殖能力的影响;3.探究过表达CircPGM5对膀胱癌细胞迁移功能的影响。方法:1.通过琼脂糖凝胶电泳实验验证circPGM5是否为环状RNA;2.通过实时定量PCR(QPCR)技术检测膀胱癌组织及细胞系中CircPGM5的表达量;3.用慢病毒方法稳定转染膀胱癌细胞,并通过QPCR技术检测出感染效果;4.通过流式细胞术检测过表达CircPGM5对膀胱癌细胞(T24和EJ)周期的影响;5.通过平板克隆CCK8和EDU实验检测过表达CircPGM5对膀胱癌细胞(T24和EJ)增殖能力的影响;6.通过细胞划痕实验检测过表达CircPGM5对膀胱癌细胞(T24和EJ)迁移功能的影响;结果:1.我们设计了不同的引物来扩增circPGM5,所得产物进行琼脂糖凝胶电泳实验,对circPGM5的q PCR产物进行了Sanger测序,以验证头对尾剪接共价结合形成;2.根据QPCR技术显示:与正常尿路上皮细胞(SV-HUC-1)和癌旁组织相比,CircPGM5在膀胱癌细胞(T24,EJ和BIU87)和膀胱癌组织中呈低表达;3.根据QPCR技术显示:在T24细胞和EJ细胞中采用慢病毒过表达CircPGM5能显著上调;4.通过流式细胞术检测结果表明:过表达CircPGM5能够使膀胱癌细胞(T24和EJ)阻滞在G1期;5.通过平板克隆、CCK8和EDU实验结果表明:提高CircPGM5表达量能够明显阻止了膀胱癌细胞(T24和EJ)的增殖功能;6.通过细胞划痕研究结果显示:提高CircPGM5表达量,膀胱癌细胞(T24和EJ)的功能不受其影响;结论:1.CircPGM5在膀胱癌组织及细胞中呈低表达;2.提高CircPGM5表达量能够明显阻止了癌细胞的增殖功能;3.过表达circPGM5在膀胱癌细胞系中细胞的迁移能力不受影响;4.CircPGM5在膀胱癌中的作用为膀胱癌的治疗提供潜在的生物标志物和治疗靶标。
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