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目的本实验以肠易激综合征(IBS)模型大鼠为研究对象,采用多通道同步记录技术、荧光PCR和免疫组织化学法等手段,观察电针“内关”、“大肠俞”穴对IBS大鼠肠道敏感性、情绪心理活动及肠道内ICC和TRPV1表达的影响,并结合IBS模型大鼠丘脑腹后外侧核(VPL)区域神经元放电和GalR1的变化,探讨电针不同经穴对IBS的效应差异及部分中枢镇痛机制。方法实验选用健康Wistar孕鼠6只,产下幼鼠后,将其随机分为空白对照组和模型组,除空白对照组外,采用母婴分离和醋酸灌肠结合结直肠球囊扩张刺激法联合制备肠易激综合征大鼠模型。造模结束后,再将模型组随机分为模型对照组、电针“内关”组和电针“大肠俞”组,每组约15只。待大鼠长至8周龄时,分别从各组随机选取大鼠进行电极埋植手术,确保每组成功3只,大鼠恢复1周后,空白对照组和模型对照组大鼠不做针刺处理,电针“内关”组和电针“大肠俞”组分别予以相应穴位的电针治疗,隔日一次,共5次。治疗结束后,根据Bristol分型观察并记录大鼠大便性状等级进行评分;采用腹部回撤反射实验对各组大鼠肠道敏感性进行评估,观察潜伏期、收缩波个数及起始波压力值;采用旷场实验检测情绪心理行为的变化,观察旷场箱内水平和垂直运动的次数;采用在体多通道同步记录技术观察脑部VPL神经元放电变化;采用荧光定量PCR(q-PCR)法检测丘脑内甘丙肽受体1(GalR1)的阳性表达情况;采用免疫组织化学方法检测结肠中辣椒素受体(TRPV1)和Cajal间质细胞(ICC)c-kit受体阳性表达情况。结果1.电针对IBS模型大鼠大便及行为学反应的影响与空白对照组相比,模型对照组大鼠大便Bristol评分极显著升高(P<0.01);腹部回撤反射实验表明大鼠疼痛反应的潜伏期极显著缩短、收缩波个数极显著增多、起始波压力值极显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.01);旷场箱内水平及垂直运动次数均极显著减少(P<0.01,P<0.01);电针“大肠俞”组垂直运动次数显著减少(P<0.05)。与模型对照组相比,电针“内关”和“大肠俞”组大鼠大便Bristol评分均极显著下降(P<0.01,P<0.01);电针“内关”组大鼠的疼痛潜伏期延长、收缩波个数减少和起始波压力值极显著升高(P<0.05,P<0.05,P<0.01),电针“大肠俞”组大鼠的疼痛潜伏期极显著延长、收缩波个数极显著减少和起始波压力值极显著升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01);电针“内关”和“大肠俞”组水平运动次数显著增多(P<0.01,P<0.05)。2.电针对IBS模型大鼠VPL神经元放电的影响与空白对照组比较,模型对照组Ⅰ、Ⅱ类神经元的放电频率极显著增加(P<0.01),电针“大肠俞”组Ⅰ类神经元的放电频率显著增加(P<0.05);与模型对照组比较,电针“内关”组VPL中Ⅰ类神经元放电频率极显著减少(P<0.01),电针“大肠俞”组VPL中Ⅱ类神经元放电频率显著减少(P<0.05)。3.电针对IBS模型大鼠丘脑内GalR1、结肠TRPV1和c-kit阳性表达的影响与空白对照组比较,模型对照组的GalR1无显著性变化(P>0.05),而TRPV1和c-kit免疫阳性表达水平极显著升高(P<0.01,P<0.01),电针“内关”组c-kit免疫阳性表达水平极显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,电针组GalR1无显著性变化(P>0.05),而TRPV1和c-kit免疫阳性表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。与电针“内关”组相比,电针“大肠俞”组TRPV1和c-kit免疫阳性表达极显著降低(P<0.01,P<0.01)。结论(1)模型制备后,大鼠大便性状改变、肠道敏感性增高及情绪心理表现异常,符合IBS发病特征,提示母子分离加醋酸灌肠结合肠道球囊扩张可成功复制IBS模型。(2)电针可改善大鼠大便性状、情绪心理及缓解腹痛。电针“大肠俞”穴对降低IBS大鼠肠道敏感性、缓解疼痛症状的作用优于电针“内关”穴;电针“内关”穴对改善情绪心理异常症状的作用优于电针“大肠俞”穴。提示电针“内关”穴、“大肠俞”穴对改善IBS的症状有所侧重,体现了经穴效应的特异性。(3)IBS模型大鼠VPL的Ⅰ、Ⅱ两类神经元的兴奋性升高,放电频率增加;电针后发现VPL Ⅰ、Ⅱ两类神经元的兴奋性降低,放电频率减少;其中电针内关穴后Ⅰ类神经元放电频率降低的程度大于大肠俞穴,而电针大肠俞穴对Ⅱ类神经元放电频率降低的程度优于内关穴。提示内关、大肠俞二穴对VPL内神经元的调节方式可能不同,从另一个角度证实了经穴效应存在特异性。(4)IBS模型大鼠结肠内的致痛因子TRPV1和ICC含量均异常升高;而电针后使得TRPV1和c-kit含量下调,且电针大肠俞穴对TRPV1、ICC含量的调节优于内关穴。提示电针缓解IBS大鼠腹痛的部分机制可能与其调节肠道TRPV1和ICC的含量有关,且二穴对其的调节作用存在差异。