蕲艾挥发性成分的质量评价及其抗氧化活性研究

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艾叶是一种应用历史悠久的民俗植物,因其独特的药效而被历代名医视为佳品,在我国民间也被广泛利用,或以其治病养病,或以其食用充饥。艾叶在全国大部分地区均有栽培,其中以湖北蕲春所产蕲艾品质为最佳。蕲艾自明代闻名以来,即被视为道地药材,历经明、清,到现代五百多年的临床应用,一直盛誉不衰,其质优效佳,被视为灸家珍品,为“蕲春四宝”之一。无论是作为艾灸的灸材还是作为中药饮片,蕲艾均具有明显的优势,称为艾叶的道地药材是实至名归的。本课题以蕲艾挥发油为研究对象,对其化学成分、质量标准、指纹图谱及体外抗氧化活性进行初步研究。首先采用顶空固相微萃取(HS-SPME)与气相色谱质谱联用(GC-MS)技术分析不同产地艾叶的挥发性成分,再利用主成分分析方法及聚类分析方法分析所得数据,确定不同产地艾叶之间的联系;而后进一步研究了蕲艾植株的不同部位及蕲艾在不同采收时间里挥发油化学成分的差异性;建立了蕲艾挥发油的质量标准,建立蕲艾挥发油完善的指纹图谱,为其质量评价提供依据;测定蕲艾挥发油的抗氧化能力,为开发更多纯天然、安全的抗氧剂做出贡献。本研究为蕲艾挥发油的质量控制奠定了基础,同时又结合蕲艾道地性的地方特色,为蕲艾的深入开发提供科学依据,具有重要的学术价值与现实意义。1、采用HS-SPME-GC-MS技术分析不同产地艾叶的挥发性成分,再利用主成分分析方法及聚类分析方法分析所得数据,初步鉴定出84种化合物,分析可得出不同产地艾叶挥发性成分的含量及分布特征。研究表明:不同产地艾叶挥发性成分有一定差异,其中湖北蕲春所产艾叶品质最好,采用主成分分析及聚类分析法能有效区分不同产地的艾叶。该研究可为艾叶挥发性成分的质量评价奠定科学基础。2、采用水蒸气蒸馏法(SD)提取蕲艾叶、蕲艾花、蕲艾茎及5月至10月不同采收期的蕲艾叶挥发油,结合气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析其化学组成。结果发现,不同部位中,蕲艾叶片中挥发油的含量最高,挥发性成分种类也最高,其次是蕲艾花,蕲艾茎含量最低。不一样的采收期,蕲艾出油率不同,其中6月最高。SD-GC-MS分析表明,不同采收期蕲艾挥发油均检测出含量较高的桉油精、樟脑、冰片、石竹烯等。蕲艾叶为蕲艾的最佳药用部位,6月为蕲艾的最佳采收期。3、本实验对蕲艾挥发油进行相对密度、折光率考察;对蕲艾挥发油中的指标性成分桉油精、侧柏酮、樟脑、龙脑、石竹烯及氧化石竹烯进行了检测。以多项指标对蕲艾挥发油的质量进行控制,建立了蕲艾挥发油的质量标准,为中药制剂用蕲艾挥发油的质量控制提供了实验依据。4、采集15批次蕲艾样品,依照《中国药典》2015年版第四部通则2000中药其他方法项下2204挥发油测定法的相关规定,得到挥发油后,比较15批次蕲艾的出油率。利用GC-MS对不同批次蕲艾挥发油进行图谱分析,建立蕲艾挥发油的GC-MS指纹图谱,作为蕲艾挥发油的鉴定和内在质量评价依据。5、采用DPPH·法,对蕲艾挥发油体外抗氧化条件进行优选,并在此基础上对其抗氧化活性进行了研究。实验将蕲艾挥发油与市面常用抗氧化剂BHT和VE进行对比,试验结果表明,蕲艾挥发油随着浓度的增加其清除DPPH·能力迅速提高,在各个浓度条件下均强于VE;但与BHT比较时发现,其清除率在低浓度(≤12mg/mL)时弱于BHT,在高浓度(>12mg/mL)时其抗氧化能力较大,在相同浓度下甚至超过BHT的清除率。不同批次蕲艾挥发油对DPPH·清除率差异较小,表明不同批次的蕲艾挥发油具有较稳定的抗氧化能力。
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