MYC转录因子家族参与植物生长发育、抗逆、次生代谢调控等过程。本实验室为了研究烟草合成烟碱的调控机制,通过对烟草打顶前后的蛋白质组进行差异分析,发现MYC1a/1b是两种表达差异显著的蛋白质,已有文献证明MYC2a/2b参与烟碱合成的调控。MYC1a/1b和MYC2a/2b同属MYC转录因子家族,那么MYC1a/1b是否与烟碱合成调控有关呢?因此,本文围绕MYC1a/1b基因进行了初步研究,主要内容如下:1.从烟草中克隆了MYC1a/1b基因,并进行生物信息学分析2.构建了MYC1a/1b过表达载体和三个沉默表达载体。转化烟草做瞬时表达实验。过表达烟草中的MYC1a、MYC1b分别增加了2.9倍、2.5倍,PMT增加了4.6倍、4.73倍;沉默表达烟草中的MYC1a、MYC1b分别降至0.214倍、0.235倍,PMT降至0.2倍。3.采用农杆菌介导的叶盘转化法将构建的MYC1a/1b植物表达载体转化烟草。转基因烟株的分析表明MYC1a过表达转基因烟中的MYC1a表达量分别增加2.28倍,PMT增加11.15倍;沉默转基因烟草中的MYC1a、1b表达量分别降至0.26、0.41倍,PMT降至0.09倍。这些结果表明,转录因子MYC1a和MYC1b的过表达能够提高烟碱合成关键酶PMT的表达水平,二者的沉默表达能够降低PMT的表达水平,即MYC1a/1b转录因子能正向调控烟碱合成。4.为进一步分析MYC1a/1b在烟碱合成调控中的作用,从烟草中克隆了MYC1b基因的启动子,对MYC1a/1b的启动子序列进行分析,发现包含MeJA、ABA、WRKY、bHLH、MYB、MYC等一些重要的响应逆境胁迫的顺式作用元件。