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目的:放射性肺损伤(radiation induced lung injury,RILI)是胸部肿瘤放疗过程中正常肺组织受到射线照射产生的病理结果,目前针对放射性肺损伤相关治疗的副作用较多,因此从中医药寻求有效的防治方法具有重要意义。转化生长因子—β(TGF-β)是一类调节细胞生长和分化的多肽,研究表明放疗后血浆TGF-β 1水平升高可作为发生放射性肺损伤的预测因子。通过X射线照射小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ),建立放射性损伤AEC Ⅱ模型,观察加味麻杏石甘汤对放射后小鼠AEC Ⅱ的24h、48h、72h的细胞增殖率,细胞的凋亡率,TGFβ-1、smad2、smad3、smad6、smad7 mRNA,磷酸化 smad2、smad3,非磷酸化smad6、smad7蛋白表达情况的影响,并探讨其抗放射性肺损伤的机制。方法:1、制备含药血清:清洁级SD大鼠18只,200-250g,复方麻杏石甘汤制成生药浓度为2.44g/ml,每天给药两次,给药3d,末次给药后1h-2h采血;2、细胞放射性损伤模型的建立:以3.64Gy/min,总剂量8Gy的X线照射小鼠AEC Ⅱ,建立放射性损伤的小鼠AEC Ⅱ。3.标本的处理及主要观察指标与方法:以5%、10%、15%的复方含药血清组与正常大鼠血清组分别干预放射性损伤的小鼠AEC Ⅱ,检测24h、48h、72h各时间点的AEC Ⅱ增殖水平,48h后AEC Ⅱ的凋亡率;RT-PCR法检测AEC Ⅱ内TGF-β 1、Smad2、Smad3、Smad6和Smad7 mRNA水平,Western Blot法检测AEC Ⅱ内TGF-β/Smad信号转导通路下游信号分子磷酸化Smad2、Smad3与非磷酸化Smad6和Smad7蛋白的表达水平。结果:1.小鼠AEC Ⅱ增殖结果显示:含药血清低、中、高剂量组干预24h、48h、72h后,小鼠AEC Ⅱ活力均较正常大鼠血清组显著下降(P<0.01),其中含药血清组在干预24h时间点,随含药血清组浓度的增加活力进行性降低(P<0.01),在48h时间点,含药血清中、高剂量组较低剂量组活力低(P<0.01),中、高组间无明显差异;在72h时间点,含药血清中剂量组较低、高剂量组活力低(P<0.01),高剂量与低剂量组无明显差异。2.小鼠AEC Ⅱ凋亡结果显示:含药血清低、中、高剂量组干预48h后,各组凋亡率较大鼠正常血清组高(P<0.01),含药血清各组间无明显差异。3.RT-PCR实验结果显示:含药血清低、中、高剂量组smad2 mRNA水平较正常大鼠血清组降低(P<0.05);含药血清中剂量组smad2 mRNA水平较含药血清低剂量组降低(P<0.05),含药血清高剂量组smad2 mRNA水平较含药血清低、中剂量组均无明显差异。含药血清低、中、高剂量组smad3 mRNA水平较正常大鼠血清组无明显差异。含药血清中、高剂量组smad6 mRNA水平较正常大鼠血清组上升(P<0.05);正常大鼠血清组smad6 mRNA水平较空白对照组下降(P<0.05);含药血清中、高剂量组smad6 mRNA水平较含药血清低剂量组上升(P<0.05),但两者之间无明显差异。含药血清中、高剂量组smad7 mRNA水平较正常大鼠血清组上升(P<0.05);含药血清低剂量组smad7 mRNA水平较正常大鼠血清组无明显差异;含药血清中、高剂量组smad7mRNA水平较含药血清低剂量组上升(P<0.05),但两者之间无明显差异。含药血清低、中、高剂量组TGF-β1 mRNA水平较正常大鼠血清组均降低(P<0.05),但随浓度的增加TGF-β1 mRNA水平无明显差异。4.Western-blot结果显示:含药血清低、中、高剂量组P-smad2蛋白水平较正常大鼠血清组低(P<0.05),且含药血清低、中、高剂量组随浓度的增加P-smad2蛋白水平进行性降低(P<0.05);含药血清低、中、高剂量组P-smad3蛋白水平较正常大鼠血清组低(P<0.05),含药血清中、高组P-smad3蛋白水平较含药血清低剂量组低(P<0.05),但两者间无明显差异;含药血清中、高剂量组smad6蛋白水平较正常大鼠血清组高(P<0.05),含药血清低剂量组smad6蛋白水平较正常大鼠血清组无明显差异,且含药血清低、中、高剂量组随浓度的增加smad6蛋白水平进行性增高(P<0.05);含药血清中、高剂量组smad7蛋白水平较正常大鼠血清组高(P<0.05),含药血清低剂量组smad7蛋白水平较正常大鼠血清组低(P<0.05),且含药血清低、中、高剂量组随浓度的增加smad7蛋白水平进行性增高(P<0.05)。结论:加味麻杏石甘汤能够显著抑制放射性损伤的AEC Ⅱ的增殖、促进其凋亡,并能够抑制细胞中TGF-β1和smad2 mRNA的基因表达,增加smad6、smad7 mRNA的基因表达,下调smad2和smad3蛋白在细胞中的表达,升高smad6和smad7蛋白的表达。