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肝脏疾病是目前威胁人类健康的最重要的疾病之一，肝损伤由于其发病原因的普遍性和多样性而在人群中广泛存在，肝损伤会产生很多并发症，包括感染性并发症、肝创面胆漏、继发性出血、急性肝肾肺功能障碍，少数严重患者会导致暴发性或重症肝功能衰竭，死亡率极高。根据其致病原因分为免疫性肝损伤、药物性肝损伤、化学性肝损伤、缺血再灌注肝损伤、病毒性肝损伤、放射性肝损伤、酒精性肝损伤、非酒精性脂肪性肝病等多种类型的肝损伤。目前临床上安全有效的治疗药物或手段十分有限，寻找预防和治疗肝损伤的安全有效方法将十分有必要。本研究采用野生型小鼠构建不同类型的肝损伤模型，探索单磷酸腺苷（Adenosine5’-monophosphate，5’-AMP）通过不同的分子机制对不同类型肝损伤的保护作用，为其成为潜在的肝损伤防治药物提供了理论基础。 向C57BL/6野生型小鼠体内同时注射半乳糖胺/脂多糖(D-galactosamine/lipopolysa-ccharide，GalN(500mg/kg)/LPS(5μg/kg))构建急性肝损伤模型，6h后小鼠开始死亡，24h后其存活率只有33.3％，而在GalN/LPS前30min注射5’-AMP(10mg/20g)的小鼠在GalN/LPS刺激24h后存活率有93.3％。GalN/LPS处理4h后检测检测小鼠血清生化指标和肝脏组织病理，结果显示与GalN/LPS模型组比较，5’-AMP预处理组小鼠血清的谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的酶活性显著下降，肝细胞坏死程度和炎细胞的浸润显著降低。定量PCR结果显示GalN/LPS处理后小鼠肝脏的细胞因子包括肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）和单核细胞趋化因子(MCP-1)基因的表达增加，5’-AMP预处理使这些基因表达显著下降。GalN/LPS导致的腺苷受体敲除小鼠（A1AR-/-、A2aAR-/-、A2bAR-/-和A3AR-/-）肝损伤的死亡率与野生型小鼠无显著性区别，且5’-AMP预处理可显著降低其死亡率。此外，免疫沉淀数据显示LPS刺激使核转录因子NF-κB激活转位至细胞核，而5’-AMP并未减少NF-κB转位至细胞核，但染色质免疫沉淀数据显示5’-AMP使LPS刺激的NF-κB与下游靶基因(TNF-α、IL-6和IL-1β)启动子的结合能力显著降低。5’-AMP预处理能显著上升胞内腺苷水平，5’-AMP使S-腺苷-L-蛋氨酸(AdoMet)与S-腺苷高半胱氨酸的比例(AdoHcy)显著下降，即细胞甲基化潜力下降，从而使LPS所致组蛋白H3K4二甲基化与下游靶基因TNF-α的启动子结合能力显著降低，体外生化实验证明了腺苷可直接抑制NF-κB与下游靶基因TNF-α和IL-6启动子的结合。5’-AMP处理使腺苷水平的升高能有效抑制GalN/LPS诱导的炎症反应，表明5’-AMP可作为潜在的改善GalN/LPS诱导的免疫性肝损伤的保护物质。 将野生型小鼠过夜禁食12-16h后，注射对乙酰氨基酚（acetaminophen，APAP,300 mg/kg)建立急性肝损伤模型，APAP处理24h后检测小鼠血清生化指标和肝脏组织病理，结果显示APAP组小鼠血清AST和ALT的酶活性显著上升，肝细胞大量坏死并出现大面积融合，而5’-AMP处理后显著降低AST和ALT的酶活性，肝细胞坏死显著减少且坏死区域融合面积显著减少。在HepG2细胞中，MTT检测结果显示5，-AMP可抑制APAP毒性导致的细胞活力的减少，PI染色结果显示5，-AMP使APAP毒性导致的细胞凋亡显著减少。在APAP处理后0-4h，APAP肝毒性导致小鼠肝脏的ATP和GSH急剧下降，而5’-AMP处理并未使ATP和GSH回升，但在APAP刺激后24h时，5’-AMP处理使肝脏ATP和GSH含量明显回升且显著高于APAP模型组。定量PCR数据显示，APAP处理后小鼠肝脏的调控凋亡相关基因c-Jun和c-Fos的基因表达上升，而5’-AMP处理使其基因表达显著降低。进一步，免疫沉淀数据显示，5’-AMP对小鼠肝脏的JNK和MKK4总蛋白水平无影响，但使p-JNK、p-MKK4和p-ASK1和ASK1水平显著降低，同时，免疫共沉淀结果显示，APAP刺激后ASK1的泛素化处于基础的较低水平，但5’-AMP处理使得ASK1泛素化水平增加，导致ASK1降解加快最终使总ASK1蛋白降低。此外，福尔马林镇痛实验结果显示，5’-AMP+APAP组与APAP组小鼠的疼痛反应累积时间都能显著减少。5’-AMP处理对APAP诱导的急性肝损伤的保护作用表明5’-AMP可作为一种潜在的与APAP组合形成医药组合物且可减轻APAP导致的药物性肝损伤的保护物质。 采用野生型小鼠注射四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl4，300μL/kg）诱导急性肝损伤，CCl4处理后0h、24h和48h后检测小鼠血清生化指标和肝脏组织病理，结果显示CCl4组小鼠血清AST、ALT和乳酸脱氢酶(LDH)的酶活性显著上升，肝细胞出现大面积坏死，而5’-AMP处理使血清AST、ALT和LDH的酶活性显著降低，肝细胞坏死显著减少。CCl4处理后，脂质过氧化产物MDA显著上升和自由基清除剂GSH显著下降，5’-AMP处理可显著降低MDA含量且使GSH含量显著上升。此外，CCl4处理后24 h时，小鼠肝脏的炎症因子（TNF-α、IL-6和IL-1β）的基因表达明显上升，5’-AMP处理使其表达显著下降。此外，HPLC数据显示CCl4处理后小鼠肝脏的ATP含量急剧下降，5’-AMP处理使肝脏的ATP含量显著性上升，同时定量PCR数据显示，5’-AMP使调控ATP合成的UCP2基因和上游转录因子PPARα的基因表达显著降低。5’-AMP对CCl4诱导的化学急性肝损伤的保护作用表明5’-AMP可作为潜在的防治CCl4所致的化学性肝损伤的保护物质。 综上所述，5’-AMP对哺乳动物急性肝损伤的保护作用表明5’-AMP可作为潜在的预防和治疗肝损伤的药物。