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目的：通过两种分离培养方法所得MSCs的生长特征和微环境的比较,选择一种可以快速、安全、高效地为临床和试验提供大量优质MSCs的方法。方法：提取C57BL/cA、鼠的骨髓,分别作密度梯度离心法和全骨髓贴壁培养分离法分离培养MSCs,并比较各自所得细胞的生长曲线、培养液中的VEGF、SDF-la浓度,评价方法优劣,也对所得细胞作了成脂、成骨分化,和流式细胞仪鉴定其表面抗原。结果：与密度梯度离心法相比,全骨髓贴壁分离法所得原代细胞有较快的生长速度,较短的生长周期；培养液中VEGF和SDF-1α浓度也稍高于密度梯度离心法；两种方法所得细胞均可成脂成骨分化,细胞表面表达CD29+、CD31-、CD34-、CD45-结论：全骨髓贴壁培养法可以快速、方便、有效地为临床和实验提供大量MSCs,这种方法所得细胞的培养为环境优于密度梯度离心法,减少了对细胞功能的损害。目的：寻找干细胞特异性miRNAs调节CXCR4?,提高MSCs的迁移能力。方法：生物信息分析miRNA-290族可能靶向作用于CXCR4,利用miRNA-290族模拟物、抑制物瞬时转染MSCs,检测CXCR4的mRNA表达和蛋白水平,发现miRNA-290族可已上调或下调CXCR4表达；作重组基因双荧光报告法检测靶基因；miRNA-290族模拟物、抑制物瞬时转染MSCs,作Transwell实验检测其迁移能力,PI单染色法、MTT实验检测细胞增殖情况。结果：miRNA-290族模拟物可以抑制CXCR4表达,抑制物可以上调CXCR4表达；miRNA-290族可以靶向作用于CXCR4; miRNA-290族模拟物促进MSCs增殖,miRNA-290族抑制物抑制了MSCs增殖；miRNA-290族模拟物抑制了MSCs迁移能力,miRNA-290族抑制物提高了MSCs迁移能力。结论：miRNA-290族可以调节CXCR4的表达,通过靶基因双荧光报告体系说明miRNA-290是直接靶向作用于CXCR4的;1niRNA-290族可以调节MSCs的迁移能力；miRNA-290族对MSCs生长增殖产生了一定影响目的：探讨下调MSCs的miRNA-290族的表达后对SDF-1/CXCR4轴的下游P13K/akt的影响,以及对MSCs表达VEGF、MMP-9和抗凋亡能力产生的影响,方法：在同一浓度SDF-1α、P13K特异抑制物或CXCR4抑制物干预miRNA-290族抑制物瞬时转染的MSCs; western blot检测SDF-1α/CXCR4信号轴下游的P13K/akt、和VEGF、MMP-9的表达情况；在无胎牛血清的情况下培养上述细胞,利用Annexin V/PI双染检测MSCs周亡情况结果：SDF-1可以促进SDF-1/CXCR4下游P13K/AKT的表达,这一作用在iti-miRNA-290组表现更加明显,且被CXCR4拮抗剂所抑制；SDF-1处理组的VEGF和MMP-9的表达高于未处理组,anti-miRNA-290转染组的VEGF和MMP-9的表达高于SDF-1P13K处理组,而P13K抑制物处理组VEGF和MMP-9的表达较anti-miRNA-290转染组明显下降。SDF-1处理组的抗凋亡能力优于无处理组；anti-miRNA-290转染组的抗凋亡能力进一步提高,而P13K抑制物处理组抗凋亡能力大幅下降结论：anti-miRNA-290上调SDF-1/CXCR4信号,通过激活下游PI3K/AKT途径促进VEGF, MMP-9表达,并提高了MSCs抗凋亡能力