【摘 要】
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背景:离体肺灌注（Ex vivo lung perfusion,EVLP）已发展成为评估边缘供肺最有效的技术。本研究试图建立EVLP系统,并用液体净化技术延长EVLP的运行时间至12小时,取代定期更换灌流液的方式,减少EVLP运行成本。第一部分方法:将实验猪随机分为对照组和热缺血组。热缺血组采用交流电诱导室颤方法使猪心跳停止,并在热缺血一小时后进行供肺获取;对照组则在麻醉后常规开胸获取供肺。两组供
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背景:离体肺灌注（Ex vivo lung perfusion,EVLP）已发展成为评估边缘供肺最有效的技术。本研究试图建立EVLP系统,并用液体净化技术延长EVLP的运行时间至12小时,取代定期更换灌流液的方式,减少EVLP运行成本。第一部分方法:将实验猪随机分为对照组和热缺血组。热缺血组采用交流电诱导室颤方法使猪心跳停止,并在热缺血一小时后进行供肺获取;对照组则在麻醉后常规开胸获取供肺。两组供肺随即接入自建的EVLP系统。EVLP按标准流程进行灌注,当供肺氧和指数、肺顺应性或肺动脉压力达到终止标准后停止运行EVLP。观察EVLP维持这两组供肺生理功能稳定的最长时间,并观察期间各项生理参数、血气分析和电解质等的变化。结果:8头小型猪,随机分成对照组和热缺血组,每组各4头。供体体重、顺灌时间、逆灌时间和供肺获取时间均无差异。两组各有2例主要因氧和指数下降而终止EVLP,各有2例主要因严重肺水肿而终止EVLP。对照组平均EVLP运行时间6.50±1.80小时,热缺血组平均EVLP运行时间6.00±1.58小时,p=0.691。EVLP期间,肺ΔPO2在多数终止EVLP前都存在短时间明显下降;对照组有两例肺动脉压力在EVLP第3个小时后升高较为明显;在肺顺应性及气道峰压指标中,热缺血组的变化更为明显;在内环境指标方面,两组均呈现葡萄糖和p H逐渐下降,钠钾浓度逐渐升高的变化趋势。第二部分方法:获得临床由于感染或局部损伤而弃用的右侧供肺,冷藏18-24小时后,随机分为对照组和净化组进行EVLP。对照组采用传统方法行EVLP,每小时置换250ml灌注液,净化组在管路中加入净化旁路,以400ml/h速度进行灌注液净化,不添加含蛋白灌注液。观察两组EVLP期间气道峰压、肺动脉压、氧和指数、电解质、乳酸、炎症因子的变化,灌注结束后取相应肺组织制作石蜡切片,进行苏木精伊红（HE）染色,并进行TUNEL检测观察组织细胞凋亡情况。结果:共获得8个临床弃肺,随机分为两组,每组4例,分别按照净化方法和传统方法进行EVLP。对照组中有3例因严重肺水肿、肺功能下降而提前终止治疗,其余5例均达到12小时终点。前8小时两组间气道峰压、肺动脉压、氧和指数没有显著性差异。对照组p H值明显低于净化组,钾和乳酸水平明显高于净化组。EVLP期间两组炎症标志物TNF-α、IL-1beta、IL-6、IL-8、IL-10和MCP-1均有不同程度升高,其中净化组IL-6、IL-10在前6小时升高程度更明显。HE染色显示两组均存在明显肺损伤,无显著性差异。对照组TUNEL阳性细胞（69.5±2.3%）明显高于净化组（47.5±2.2%）（p<0.001）。结论:通过自建的EVLP系统和自制的常温供肺灌注液能够顺利开展EVLP技术。具备灌注液净化能力的EVLP系统可以更好的长时间保存供肺,并避免定时更换灌注液从而降低了运行费用。
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