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背景：WISP1（CCN4）是Wnt/β-catenin信号通路激活后诱发转录的基因之一，其编码的蛋白属于CCN蛋白家族，具有多种调控功能，是连接细胞外基质及细胞信号传导的重要因子。CCN蛋白通过结合整合素受体激活信号通路，而整合素信号通路的激活在急性肺损伤中发挥重要作用。近来研究发现WISP1是机械通气诱导肺损伤的易感基因，而巨噬细胞在肺的炎症反应中具有重要作用。目的：本研究拟在巨噬细胞模型中探讨WISP1单独或与TLRs激动剂共同刺激对巨噬细胞炎症因子分泌的影响，以揭示WISP1在炎症发生中的作用机制，为WISP1介入治疗急性肺损伤提供新的理论基础。方法：首先在细胞水平，观察WISP1在炎症反应中的作用，通过ELISA检测细胞培养基中促炎因子TNF-α的水平，比较直接给予WISP1刺激或RGDs预处理阻断整合素通路后WISP1刺激对巨噬细胞分泌炎性因子的影响，并通过免疫印迹检测下游信号因子p38MAPK、NF-κB的磷酸化水平，在分子水平探讨细胞内的信号传导机制。其次通过分离脂筏或免疫荧光的方法检测WISP1单独或与LPS共同刺激对TLR4受体复合物向脂筏募集过程的影响。再次，观察TLRs激动剂刺激对巨噬细胞中整合素表达水平影响，并通过TLR相关通路基因敲除小鼠（TLR4、CD14、TRIF）验证TLR通路的完整性对整合素表达的重要性。最后，观察WISP1与TLRs激动剂共同刺激巨噬细胞后，巨噬细胞炎症反应性的变化，明确WISP1-整合素信号通路与TLR通路间的相互影响在炎症反应中的作用。结果：1).WISP1单独刺激RAW264.7细胞后， p38MAPK，NF-κB（P65）的磷酸化水平增加，促炎因子TNF-α的分泌增加（P<0.01）。RGDS预处理阻断整合素结合后，抑制TNF-α的分泌（P<0.05）。表明整合素受体介导了WISP1的促炎作用。2).WISP1增加MD2、整合素β3在脂筏分布。TLRs激动剂刺激原代腹腔巨噬细胞后，AKT、p38MAPK、NF-κB通路磷酸化水平增加,整合素β1，整合素β3的表达水平上调（P<0.01），敲除TLR相关通路基因（TLR4、CD14、TRIF）后TLRs激动剂上调整合素表达的作用降低甚至消失。此结果表明TLRs炎性信号通路的激活可上调WISP1整合素受体的表达。3).WISP1与TLRs激动剂共同刺激细胞后，TNF-α的水平较二者单独刺激明显增加（P<0.05），RGDS预处理后，二者共同作用与单独刺激无明显差异。进一步证明整合素受体介导了WISP1与TLRs激动剂之间的协同促炎作用。结论：WISP1通过与巨噬细胞表面整合素受体作用而激活p38MAPK及NF-κB炎性信号通路。WISP1通过整合素受体上调TLRs受体复合物的形成，从而增强TLRs激动剂增强炎症反应强度。而TLRs信号通路的激活反过来又增强整合素的表达，因此正反馈上调WISP1的促炎功能。这种正反馈弧的形成是WISP1在巨噬细胞中与TLRs激动剂协同促炎的机理。