本研究探讨Lmo4基因对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的调控作用。转录调节因子LMO4最初是在乳腺癌患者的血清中被发现,其主要是作为乳腺癌蛋白发挥作用。已有研究表明,Lmo4基因的表达量在BMSCs成骨分化的过程中不断变化。因此,本课题主要研究LMO4在调控BMSCs成骨分化过程中的作用。实验策略主要通过包装靶向Lmo4的sgRNA慢病毒转染表达Cas9蛋白的骨髓间充质干细胞,运用CRISPR/Cas9技术在BMSCs中敲除Lmo4;包装Lmo4的pMSCV逆转录病毒转染野生型BMSCs,在细胞中过表达Lmo4。对病毒转染后的细胞进行成骨诱导分化,采用碱性磷酸酶染色和茜素红S染色两种方法对各组细胞进行染色,并运用实时荧光定量PCR技术对细胞的Lmo4基因,以及成骨分化相关基因Runx2、ALP、Col1a1、Osteocalcin的表达水平进行定量分析,比较各组细胞成骨能力的差异。结果显示,sgRNA介导的Lmo4敲除细胞与对照组相比,两种染色明显加深,Lmo4的表达量明显下降,成骨分化相关基因的表达量明显上升。相反,pMSCV逆转录病毒介导的Lmo4过表达细胞与对照组相比,两种染色明显变浅,Lmo4的表达量明显上升,成骨分化相关基因的表达量明显下降。上述结果提示Lmo4能够抑制骨髓间充质干细胞的成骨分化。本研究发现了一个新的骨发育与分化的调控因子。