囊泡运输在维持细胞内膜系统的稳态以及植物生长发育过程中发挥重要功能。SNARE（Soluble NSF Attachment Protein Receptor）是调控囊泡运输的关键蛋白,膜融合过程通常需要3个Q-SNAREs（Qa-、Qb-、Qc-）和一个R-SNARE形成复合体。拟南芥 Qa-SNARE 蛋白 SYP3（Syntaxin of plant 3）家族包含 SYP31 和 SYP32 两个成员。前期研究表明SYP31和SYP32在花粉发育过程中功能冗余,且在维持高尔基体形态及外泌途径具有必要功能。但是二者之间是否存在功能差异及具体的作用机理并不清楚。本研究通过syp32/+突变体表型分析和遗传互补实验研究发现SYP32对雌配子体的发育不可或缺;利用Dex（Dexamethasone）诱导性RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术发现SYP32在拟南芥幼苗期影响中央大液泡形成。进一步通过亚细胞定位及蛋白互作组的分析暗示SYP32可能具有独特于SYP31之外的功能,并且很可能参与调控液泡运输途径。主要研究结果如下:1.拟南芥SYP32在雌配子体发育过程中的重要功能T-DNA插入突变体syp32/+（GK109A09插入位点在第二个外显子上,和GK920F05插入位点在第二个内含子上,两条株系的后代中均无法鉴定到纯合突变体）的后代分离比为1:1,暗示可能存在配子体传递缺陷。正反交实验进一步表明syp32雌配子体传递效率为零,说明SYP32的缺失导致雌配子体（胚囊）败育。通过表型分析发现,syp32/+突变体成熟期雌蕊中约50%的胚囊败育。进一步分析胚囊的早期发育过程,发现syp32/+FG1（Female gametophyte1）和FG2时期胚囊的发育正常,但是FG3和FG4时期开始表现出中央大液泡的缺失,FG5时期雌配子体明显开始败育,并且在突变体同一雌蕊中,雌配子体的发育严重不同步。这些结果表明SYP32可能在雌配子体发育过程中调控中央大液泡的形成。2.Dex::RNAi-SYP32幼苗下胚轴生长受到抑制,子叶和下胚轴的液泡碎片化syp32/+雌配子体的败育导致无法获得纯合突变体,为了研究SYP32在孢子体生长发育中的功能,并更进一步研究SYP32在液泡形成过程中的作用机制,我们利用Dex诱导性RNAi技术创建了Dex::RNAi-syp32转基因植株。通过qRT-PCR对光照培养5天的Dex::RNAi-syp32幼苗基因型进行确定,Dex::RNAi-syp32小苗中SYP32的表达量下调了一半。Dex::RNAi-syp32幼苗矮小、子叶黄化且下胚轴短小。暗培养4天后,其下胚轴生长缺陷更加明显,扫描电镜结果显示,细胞明显短小且细胞壁异常凸起。FM4-64染色结果发现,子叶和下胚轴细胞呈现碎片化的液泡。3.与SYP31相比,SYP32可能参与调控液泡运输途径本研究中,SYP31定位在cis-Golgi,与前人研究结果一致;而SYP32定位在cis-Golgi、trans-Golgi和TGN。突变体表型分析发现,纯合的syp31/-T-DNA插入突变体（SALK057421C）并不影响植物生长发育,暗示其功能可以被SYP32互补。而SYP32敲除突变造成雌配子体的败育,并且利用SYP32启动子驱动SYP31表达并不能互补syp32/+的缺陷。此外在Dex::RNAi-syp32幼苗中,SYP31的表达量上调,但是植株却表现出严重的生长发育表型。这些结果说明SYP32具有其特有的功能。通过串联亲和纯化耦联质谱来鉴定分别与SYP31和SYP32相互作用的蛋白,结果发现一些特异地和SYP32共纯化的蛋白,包括VTI11和VAMP727等。VTI11和VAMP727是液泡运输途径中的重要蛋白。结合syp32胚囊以及Dex::RNAi-syp32幼苗中液泡的缺陷,这些结果说明相较于SYP31,SYP32可能还具有调控液泡运输的功能。