MNNG诱发WISTAR大鼠胃癌癌变早期细胞生物学动态变化的研究

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目的:胃癌在消化道肿瘤中对人类的危害居于首位,本实验通过动物胃癌模型探讨和研究其癌变机理,为胃癌的早期诊断、治疗和预防提供理论依据。 动物模型:本实验用Wistar雄性大鼠作为实验动物,用MNNG作为诱变剂,以灌胃方法给大鼠用药,然后辅以高浓度食盐水和二期口服MNNG以促进胃癌的发生,建立大鼠癌变早期模型。 材料:分批处死大鼠,在前胃和腺胃的前、后壁分别取材四块,做病理切片和免疫组化备用;在腺胃壁内膜刮取粘膜上皮,匀浆,做电泳和免疫印迹备用。 方法:本实验的实验方法主要采用组织病理切片法,Westernbloting印迹,免疫组化,活性电泳,同工酶电泳等。 结果:本实验对大鼠胃癌早期细胞癌变进程中细胞形态、HSP70、蛋白水解酶、ALP和ACP等进行了连续的动态研究:(1)根据病理切片观察结果,结合临床病理分级,将本实验癌变早期细胞的不同变化分为五级:单纯增生、不典型增生Ⅰ、不典型增生Ⅱ、不典型增生Ⅲ、高分化腺癌。(2)HSP70的表达在给药后21天(第1批)实验大鼠中HSP70表达较强,42天(第2批)恢复趋于正常,163天(第7批)表达增强,193天、223天、253天(8、9、10批)依次增强。在Westernbloting印迹和免疫组化两种方法所得结果一致。(3)蛋白水解酶活性与孵育液pH之间存在相关性。在pH2.0时主要表达33kD蛋白水解酶的活性,其活性的变化在最初灌药时期减弱,然后恢复正常,后期阶段表达再减弱。在pH7.0时蛋白水解酶变化复杂,灌药期和病变期,63kD、49kD、42kD、26kD蛋白水解酶表达较强。(4)ALP、ACP同工酶谱出现了强→弱→强的变化过程。ALP在253天(第10批)出现了65kD碱性磷酸酶。 结论:在诱发Wistar大鼠胃癌癌变过程中,HSP70、蛋白水解酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等细胞生物学因子的表达在药物和病理的刺激下呈现规律性的变化,同时与组织细胞形态的改变有一定的对应关系,为胃癌的早期诊断、治疗和预防提供了科学的参考依据。
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