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第一章IFNy、IFNyR、IL12、IL12R基因单核苷酸多态性与脊柱结核的相关性研究目的：探讨IFNy、IFNyR、IL12、IL12R基因单核苷酸多态性与脊柱结核易感性的关系。方法：在2010年12月至2012年12月期间,纳入符合诊断标准的新发脊柱结核患者104例、正常人群106例,应用聚合酶链式反应(PCR)和DNA直接测序法检测两组人群基因多态位点：IFNG: rs2430561; IFNGR1:rs2234711、rs7749390、rsl327474; IL12B: rs3212227; IL12RB1:rs436857、rs393548的单核苷酸基因多态性,统计各等位基因和各基因型频率,分析各位点等位基因及基因型与脊柱结核易感性之间的关系。结果：1.脊柱结核组中,IFNGrs2430561的A和T两种等位基因频率分别为29.8%、70.2%,脊柱结核组中AA, AT, TT基因型的分布频率分别为10.6%、38.5%、53%,与对照组比较,脊柱结核组等位基因频率(p=0.0242)和基因型分布(p=0.048)存在明显统计学差异,患者组等位基因A和基因型AA比例高于正常人组,表明此位点多态性与脊柱结核的发生相关,A等位基因(OR=1.67,CI=[1.067-2.611])及AA基因型(OR=4.566,95%CI=[1.211-17.210])是罹患脊柱结核的风险因素。2.脊柱结核组中,IFNGR1rs2234711的C和T两种等位基因频率分别为62.5%、37.5%,CC, CT, TT基因型的分布频率分别为40.4%、44.2%、15.4%,与对照组相比较,rs2234711的等位基因频率(P=0.585)及基因型分布(P=0.799)不存在统计学差异,此位点多态性与脊柱结核的发生无关。3.脊柱结核组中,IFNGR1rs7749390的T和C两种等位基因频率分别为40.9%、59.1%,脊柱结核组中的TT, CT,CC基因型的分布频率分别为18.3%、45.2%、36.5%,与对照组相比较,rs7749390的等位基因频率(P=0.872)及基因型分布(P=0.921)不存在统计学差异,此位点多态性与脊柱结核的发生无关。4.脊柱结核组中,IFNGR1rs1327474的A和G两种等位基因频率分别为87.5%、12.5%,AA, AG, GG基因型的分布频率分别为75%、25%、0,与对照组相比较,rs1327474的等位基因频率(P=0.720)及基因型分布(P=0.367)不存在统计学差异,此位点多态性与脊柱结核的发生无关。5.脊柱结核组中,IL12Brs3212227的A和C两种等位基因频率分别为60.1%,39.9%,AA,AC, CC基因型的分布频率分别为34.6%、51%、14.4%,与对照组比较,rs3212227的等位基因频率(P=0.309)及基因型分布(P=0.479)不存在统计学差异,此位点多态性与脊柱结核的发生无关。6.脊柱结核组中,IL12BR1rs436857的A和G两种等位基因频率分别为15.4%,84.6%,对照组中分别为0.75%,92.5%。脊柱结核组中的GG, AG,AA基因型的分布频率分别为72.1%、25%、2.9%,对照组中三种基因型的分布频率分别为84.9%,15.1%,0%。脊柱结核组等位基因频率(P=0.012)和基因型分布(P=0.035)与对照组相比存在明显统计学差异,患者组等位基因A和基因型AA比例高于正常人组,表明此多态位点与脊柱结核相关,携带等位基因A (OR=2.2272,95%CI=[1.182-4.197])是罹患脊柱结核的风险因素。7.脊柱结核组中,IL12BR1rs393548的T和A两种等位基因频率分别为88.7%,11.3%,TT,AT,AA基因型的分布频率分别为78%、24%、2%,与对照组比较,两组对象间rs393548的等位基因频率(P=0.443)和基因型分布(P=0.557)不存在统计学差异,此位点多态性与脊柱结核的发生无关。8. IFNGR1rs2234711rs7749390rsl327474三个多态位点经连锁不平衡检测表明：rs223711和rs7749390处在同一个连锁框内,可以进行单倍型分析。rs223711和rs7749390多态位点C-T单倍型是脊柱结核的风险因素(P<0.005, OR=10.838,95%CI=[1.376～85.374])。 IL12BR1rs436857rs393548两个多态位点经检测不存在连锁不平衡(D’=0.854,r2=0.665),不能进行单倍型分析。结论：1.IFNG rs2430561基因多态性与脊柱结核发病相关,A等位基因及AA基因型是脊柱结核的危险因素。2.IL12RB1rs436857基因多态性与脊柱结核发病相关,A等位基因是脊柱结核的危险因素。3.IFNGR1rs2234711, rs7749390, rsl327474, IL12B rs3212227, IL12RB1rs393548多态位点基因多态性与脊柱结核发病无关。4. IFNGR1多态位点rs2234711和rs7749390CT单倍型是脊柱结核的风险因素,携带CT单倍型的人群罹患脊柱结核的风险更高。第二章人血清干扰素γ与白细胞介素12表达水平及其影响因素与脊柱结核的相关性研究目的：探讨血清IFNy、IL12浓度与脊柱结核的相关性,探讨血清IFNy、IL12表达水平与其编码基因多态位点基因多态性的关系。方法：在2010年12月至2012年12月期间,纳入符合诊断标准的新发脊柱结核患者104例、正常人群106例,应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)险测两组人群患者血清IFNy、IL12浓度,结合已经测得的IFNG、IL12B基因型,探讨血清IFNy、IL12浓度与脊柱结核之间的相关性以及血清IFNγ、IL12表达水平与其编码基因多态位点基因多态性的关系,分析单核苷酸基因多态性影响脊柱结核发生发展的机制。结果：脊柱结核组患者血清IFN-γ平均浓度为28.19±8.27pg/ml,对照组血清IFN-γ平均浓度为39.54±10.14pg/ml,差异有统计学意义(t=-8.89,P<0.001)；脊柱结核组患者血清IL12平均浓度为55.11±13.13pg/ml,对照组血清几12平均浓度为73.16±15.90pg/ml,差异有统计学意义(t=-8.967,P<0.001)。血清IFNγ、EL12浓度可以作为临床辅助诊断脊柱结核的血清学指标。IFNGrs2430561AA基因型可引起血清IFNy浓度降低；而IL12B rs3212227位点多态性与血清IL12浓度无明显相关性,IL12血清水平降低可能是其它因素造成的。结论：1.脊柱结核患者的血清IFNyγ、IL12浓度低于正常人。2. IFNGrs2430561AA基因型可引起血清IFNy浓度降低；IL12Brs3212227位点多态性与血清IL12浓度无明显相关性。