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甜菜霜霉病(Peronospora schachtii)和甜菜胞囊线虫(Heterodera schachtii)是两种对甜菜造成毁灭性危害病原生物,于2007年被我国政府列为进境植物检疫性有害生物。目前国内有关甜菜霜霉病和甜菜胞囊线虫的相关研究报道很少,有关它们的快速检测方法的研究报道也很少,对甜菜霜霉病田间药效试验的研究也相对简单。本项目对甜菜霜霉病菌和甜菜胞囊线虫的分子检测技术及甜菜霜霉病的田间药效防治试验进行研究,建立了甜菜霜霉病菌和甜菜胞囊线虫的分子快速检测方法,并筛选出防治甜菜霜霉病效果较好的处理方式、药剂及其用量。主要研究结果如下:(1)开展了甜菜霜霉病菌分子检测技术研究,建立了甜菜霜霉病菌的快速检测方法。1)常规PCR检测方法:根据AS-PCR的原理,采用通用引物P-cox2F/P-cox2R扩增甜菜霜霉病菌mt-DNA cox2的基因序列,设计了特异性引物对BSP-F/BSP-R,通过对6种对照样品的检测验证,确定该对引物的特异性较好,最低能检测到10 pg/μL的甜菜霜霉病菌质粒DNA。2)TaqMan实时荧光PCR检测方法:根据ASPPAA-PCR原理,采用通用引物对P-cox2F/P-cox2R扩增甜菜霜霉病菌mt-DNA基因cox2的序列,设计TaqMan MGB探针BETEV-probe与引物BETEV-F/BETEV-R,该探针与引物通过对6种对照样品的检测验证其特异性较好,该探针/引物的浓度为800 nM/400 nM时扩增效果最佳,最低检测10 fg/μL的甜菜霜霉病菌质粒DNA。(2)开展了甜菜胞囊线虫的分子检测技术研究,建立了甜菜胞囊线虫的TaqMan实时荧光PCR检测方法。利用通用引物D2A/D3B扩增甜菜胞囊线虫的28S rRNA基因序列,设计了TaqMan探针HS-28s-Probe和引物HS-28s-F/HS-28s-R,通过对照样品的检测验证,确定该探针和引物的特异性较好,最低能检测100 fg/μL的甜菜胞囊线虫DNA。(3)采用叶面喷雾、药剂拌种、种子熏蒸等三种处理方法开展防治甜菜霜霉病的田间药剂试验,其中三种处理方法中叶面喷雾防治效果最好,最佳药剂50%烯酰吗啉可湿性粉剂用量为40 g/667 m2。结果如下:1)叶面喷雾处理防治效果:50%烯酰吗啉可湿性粉剂用量为40 g/667 m2时,防治效果为92.17%,防治效果最好;66.8%霉多克可湿性粉剂稀释倍数为1500倍液时,防治效果为66.15%,防治效果最差。2)药剂拌种处理防治效果:35%精甲霜灵乳剂用量为0.60%时,防治效果为67.19%,效果最好;95%敌克松可湿性粉剂0.20%防治效果为42.40%,防治效果最差。3)种子熏蒸处理防治效果:99%硫酰氟用量为40 g/m3时,防治效果为58.48%,防治效果最好;56%磷化铝用量为3 g/m3时,防治效果为37.37%,防治效果最差。