【摘 要】
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目的:基于肺络构效理论,通过行为学、分子生物学等方法研究肺纤维化大鼠凝血机制异常变化,阐明IPF形成的关键途径、环节及分子机制,并应用益气养阴活血通络法之参龙煎剂进行干预,从凝血机制角度入手探析益气养阴活血通络法干预IPF的效应机制,丰富中医肺络构效理论的科学内涵,为临床论治IPF提供科学依据。材料与方法:l.本实验将l20只大鼠（雄性）随机分为4组,即KM组（空白对照组）、MC组（模型对照组）、
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目的:基于肺络构效理论,通过行为学、分子生物学等方法研究肺纤维化大鼠凝血机制异常变化,阐明IPF形成的关键途径、环节及分子机制,并应用益气养阴活血通络法之参龙煎剂进行干预,从凝血机制角度入手探析益气养阴活血通络法干预IPF的效应机制,丰富中医肺络构效理论的科学内涵,为临床论治IPF提供科学依据。材料与方法:l.本实验将l20只大鼠（雄性）随机分为4组,即KM组（空白对照组）、MC组（模型对照组）、BM组（吡非尼酮组-西药）、SM组（参龙煎剂组-中药）,其中每30只为一组;2.通过用气管内注射博来霉素的方法给IPF动物造模,于造模次日分别给予相应药物进行干预。根据IPF疾病发生发展变化,设定造模后分三个时间截点进行取材,一并检测相应指标;3.观察大鼠一般状态;4.肉眼观察各组大鼠肺组织外观状态、HE染色探究IPF病理形态学状态、Masson染色观察纤维化形态学改变;5.通过Western Blot（WB）实验方法检测各组大鼠肺组织CD40、CD40L、VEGF的蛋白表达量;6.Elisa法检测指标PAI-l、FIX、FⅦ、PF4表达水平的影响;7.流式细胞技术,检测指标CD4l、CD62P表达水平的影响,进而阐明益气养血活血通络法对肺纤维化模型大鼠的凝血机制的调控作用。结果:l.博来霉素溶液经气管注入大鼠体内可成功造模大鼠肺纤维化模型;2.中药颗粒剂参龙煎剂可有效改善IPF大鼠一般状态,大鼠精神状态尚佳,没有萎靡不振,饮食状态,二便状态况均可;3.中药颗粒剂参龙煎剂可抑制初期泡炎,扼制中晚期胶原纤维增生,减少纤维沉积,从而改善IPF大鼠肺组织炎症变化、延缓IPF进程;4.WB检测CD40、CD40L,与参龙煎剂的相关性。与KM组相比,MC组,CD40、CD40L蛋白表达量升高（P＜0.01）;与MC组相比,BM组、SM组CD40、CD40L蛋白表达量均不同程度的降低（P＜0.05或P＜0.01）;与BM组相比,SM组CD40、CD40L蛋白表达量无显著性差异（P＞0.05）;5.WB检测VEGF与参龙煎剂的相关性。与KM组相比,MC组肺组织VEGF蛋白表达量升高（P＜0.01）;与MC组相比,BM组、SM组VEGF蛋白表达量有明显程度降低（P＜0.01）;与BM组相比,7天时,SM组VEGF蛋白表达量明显下降（P＜0.01）;第14天、第28天时,无显著性差异（P＞0.05）;6.ELISA法检测PAI-l、FIX、FⅦ、PF4指标与参龙煎剂的相关性。与KM组相比,MC组,PAI-l、FIX、FⅦ、PF4蛋白表达量升高（P＜0.01）;与MC组相比,BM组、SM组PAI-l、FIX、FⅦ、PF4蛋白表达量均不同程度的降低（P＜0.05或P＜0.01）;与BM组相比,SM组PAI-l、FIX、FⅦ、PF4蛋白表达量均不同程度的降低（P＜0.05或P＜0.01）;7.流氏检测CD41、CD62P指标与参龙煎剂的相关性。与KM组相比,MC组,CD41、CD62P蛋白表达量升高（P＜0.01）;与MC组相比,BM组、SM组CD41、CD62P蛋白表达量均不同程度的降低（P＜0.05或P＜0.01）;与BM组相比,SM组CD41、CD62P蛋白表达量均不同程度的降低（P＜0.05或P＜0.01）。结论:l.参龙煎剂调节了IPF大鼠病理状态,减轻病变严重程度,延缓IPF疾病发展过程;2.参龙煎剂可干预IPF中血小板活化,通过流氏实验中CD4l、CD62P佐证;3.参龙煎剂可降低CD40、CD40L、VEGF蛋白分子表达量的表达;4.参龙煎剂与IPF的凝血机制有关,通过ELISA实验中的PAI-l、FIX、FⅦ、PF4佐证。
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