除油菌的筛选鉴定及其应用效果的初步研究

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石油及其产品所造成的环境污染日益严重,而石油污染物的微生物治理技术,由于其原位、无二次污染、以及处理成本低等特点,受到人们的广泛关注。但是微生物降解过程通常会受到种源、环境条件等因素的影响,限制了其推广使用,因而优化微生物种源、增加其环境适应性、提高降解率是应用微生物治理技术的关键。   本文从受到石油污染的土壤中筛选分离出5株具有降解柴油能力的菌株,并对其中具有良好降解柴油的菌株HY4进行了生理生化鉴定和16S rDNA测序鉴定,经鉴定菌HY4为枯草芽孢杆菌。   通过单因素实验确定了枯草芽孢杆菌HY4最佳的发酵条件:最适温度为37℃,最适pH为7,最适接种量为5%。同时考虑枯草芽孢杆菌HY4最终要制成微生态制剂,因此考察了培养基中主要营养成分(如碳源、氮源、无机盐等)对枯草芽孢杆菌HY4生长的影响,确定了碳源对菌生长的影响大小顺序为:葡萄糖>蔗糖>可溶性淀粉>乳糖;氮源对菌生长的影响大小顺序为:牛肉膏>玉米浆>硫酸铵>豆饼粉;无机盐对菌生长的影响大小顺序为:氯化钙>氯化钠>硫酸镁>磷酸二氢钾。最后通过正交实验确定一最适菌HY4生长的培养基配方为牛肉膏20g/L,葡萄糖10g/L,氯化钙8g/L,按此培养基配方培养HY4,菌数可达到最大的36.4×108cfu/ml,从而为HY4研制成微生态制剂打下坚实的基础。   不同浓度、不同类型表面活性剂对枯草芽孢杆菌HY4生长规律及其降解柴油的影响研究表明:表面活性剂对混合菌生长的影响与其浓度有关。表面活性剂随着浓度的增加,对菌HY4生长的抑制作用就越强,且离子类型对菌HY4生长的抑制作用也越来越明显。在相同浓度下对芽孢杆菌HY4的抑制作用,阴离子表面活性剂SDS>非离子表面活性剂Tween-80。当加入非离子型表面活性剂Tween-80的浓度低于120 mg·L-1时,随着浓度的增加菌HY4对柴油的降解率也逐步提高。当浓度达到较高浓度(>120mg·L-1)时,降解率呈下降趋势。较低浓度的阴离子表面活性剂对芽孢杆菌HY4降解柴油几乎没有什么影响,但当阴离子表面活性剂浓度缓慢增加时,芽孢杆菌HY4对柴油的降解率逐渐降低,并且随着浓度的升高,抑制作用就越明显。
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