【摘 要】
:
目的:糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,DR)是糖尿病的主要并发症之一,是全球主要的致盲性眼病。前期研究发现pro NGF-p75NTR信号通路参与了糖尿病视网膜神经节细胞(Retinal ganglial cells,RGCs)的损伤,然而,其具体抗凋亡和神经保护机制并不清楚。本文通过体外细胞实验观察传统中药衍生物乙酰天麻素对RGCs中的神经生长因子前体蛋白(Pro-n
论文部分内容阅读
目的:糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,DR)是糖尿病的主要并发症之一,是全球主要的致盲性眼病。前期研究发现pro NGF-p75NTR信号通路参与了糖尿病视网膜神经节细胞(Retinal ganglial cells,RGCs)的损伤,然而,其具体抗凋亡和神经保护机制并不清楚。本文通过体外细胞实验观察传统中药衍生物乙酰天麻素对RGCs中的神经生长因子前体蛋白(Pro-nerve growth factor,pro NGF)、p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)及下游信号分子环磷酸酰苷(Cyclic Adenosine monophosphate,c AMP)、C-JUN氨基端激酶(C-JUN N-terminal kinase,JNK)、磷酸化的磷脂酰醇-3激酶(Phosphorylation phosphatidylinositol-3,PPI3K)的表达情况及细胞的凋亡水平,探究乙酰天麻素对糖尿病早期可能的神经保护机制及损伤的作用。方法:原代培养大鼠RGCs并传代,取3-8代进行后续实验。实验分为去离子水对照组、高糖RGCs模型组以及低浓度组25 mg·L-1、中浓度组50 mg·L-1、高浓度组100 mg·L-1的乙酰天麻素干预组。高糖培养基培养建立糖尿病的体外模型。通过Cell Counting Kit-8来检测RGCs活性,流式细胞术及Cleaved Caspase-3水平检测细胞的凋亡情况,利用透射电镜观察对比不同处理下细胞内部结构的超微变化,蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)检测不同处理下pro NGF、p75NTR的表达水平及下游信号分子P-PI3K、c AMP等的表达情况。结果:1.在体外培养的RGCs加入不同浓度高糖后,Cell Counting Kit-8的结果显示细胞存活率明显下降,且下降的程度与高糖浓度和孵育时间呈正比,差异有统计学意义(P<0.05);50 m M高糖培养24 h后达到半数致死量。在50m M高糖培养基中,加入不同浓度乙酰天麻素后,细胞存活率较高糖对照组提高,并且具有浓度依懒性,差异有统计学意义(P<0.05)。2.透射电镜的结果显示,高糖培养下的细胞内微体以及溶酶体较对照组含量有所增加,内质网、线粒体等细胞器数量明显减少,线粒体肿胀、嵴较对照组明显减少,高尔基体空泡增多,内质网膨大,有明显损伤现象。乙酰天麻素干预后,细胞微体以及溶酶体含量较模型组减少,内质网、线粒体等细胞器结构较高糖模型组恢复。3.流式细胞术检测结果显示:高糖模型组细胞凋亡现象较对照组明显增加,平均比率分别为54.31±2.56%和5.15±1.14%。乙酰天麻素改善了高血糖引起的细胞凋亡,加入乙酰天麻素药物后的细胞平均凋亡比率为20.09±9.16%。4.WB的结果显示模型组RGCs的Cleaved Caspase-3表达较对照组的增加。给予50mg.L-1乙酰天麻素干预后,高糖介导的RGCs上的Cleaved Caspase-3表达减少,对照组、高糖组、药物组三组相对密度分别为1.00±0.20、1.53±0.14和0.99±0.17,差异有统计学意义(P<0.05)。5.WB显示模型组RGCs中的pro NGF、p75NTR及其下游信号分子c AMP、JNK蛋白表达量较对照组显著增加,并且磷酸化PI3K和C-JUN的表达增加。50mg.L-1乙酰天麻素干预后,上述信号分子在RGCs中的蛋白的表达明显减少,相对密度分析,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:乙酰天麻素能够有效的保护早期糖尿病RGCs的凋亡和损伤,其保护机制与抑制pro NGF-p75NTR信号通路及其下游信号通路c AMP、JNK表达水平及CJUN、PI3K磷酸化有关。因此,该信号通路很有可能是乙酰天麻素保护糖尿病视网膜神经细胞病变的关键信号通路,也将增加我们对早期糖尿病视网膜神经细胞病变发病机制的认识。
其他文献
旅游城市主客群体活动空间能够反映旅游城市空间结构、基础设施配置情况以及旅游交通发展情况,认识和探讨旅游城市主客群体活动空间特征,揭示公交资源配置对主客群体活动空间的影响机制和规律,对优化旅游城市空间结构,合理配置公交资源具有重大意义。基于此,本文以旅游城市主客群体活动空间异质性的视角出发,论文以“主客群体活动空间刻画—活动空间特征分析—影响机理建模—优化对策”的逻辑思路展开研究,获取了丽江市主客群
随着网络的快速发展,以及互联网+经济模式的大力推行,人类日常生活中的信息大规模的向网络迁移,而在这些信息中含有大量的短文本信息,如何对这些信息进行快速有效的整理,提取有价值的信息成为企业和政府关注的热点问题,针对这一问题本文进行了相关研究。首先,根据中文自身的特性对现有的词向量模型进行改进,提升词向量的表征性能;其次,针对现有的特征提取网络在中文短文本中存在的不足进行相应地改进,提升网络的特征提取
镓是重要的稀散金属,在我国战略性新兴产业发展中应用广泛。镓多从冶金副产品中提取,含镓二次资源成为冶金综合利用的重要资源。采用真空技术处理含镓二次资源回收金属镓已成为当前研究热点之一。因此,开展从含镓二次资源中综合回收金属镓的相关基础理论研究尤为重要。金属镓在黄磷电尘灰等含镓二次资源中以氧化镓形式存在,而真空碳热还原过程由于其高温低压环境使得实验条件下实施温度在线监测十分困难。利用有限元分析方法计算
SUMO蛋白酶(Ulp1)是工业和科学研究上常使用的一种高特异性、高活性半胱氨酸蛋白酶,常被用作在蛋白纯化过程中移除目的蛋白N端的SUMO蛋白(Smt3)融合标签。Ulp1通过特异性识别Smt3蛋白结构,切割Smt3蛋白标签并形成具有天然N端的目的蛋白。Ulp1的一个很有趣的生化特性是其可以在底物P1’位点有效识别除Proline以外的其他19种氨基酸。然而,我们对这一生化特性的分子机制了解甚少;
木材是植物通过分化或者成长的后期产生,是植物细胞壁由于细胞内产生的木质素的沉积变得坚硬牢固的结果,它对于人类生活起着很大的支持作用。木材分为天然木材与速生木材。天然木材本身质量好,生长周期长,资源匮乏,价格昂贵;速生木材本身质量差,腐朽、变色、虫蛀、生长周期短,资源丰富,价格低廉。因此对于速生木材的增强改性迫在眉睫。合成树脂是一种人工合成的一类高分子量聚合物。按其行为分类,分为热塑性树脂和热固性树
TC4(Ti-6Al-4V)钛合金作为开发最早的α+β型两相合金,因其优异的性能被广泛应用于航空航天、海洋舰船等领域。时至今日,TC4钛合金仍是各种钛及钛合金中产量最大,应用最广的王牌合金。电子束冷床熔炼技术(EBCHM)因其优异的除杂能力现已成为洁净钛及钛合金熔炼必不可少的先进技术。单次电子束冷床熔炼的合格钛及钛合金铸锭,不需经过锻压开坯就可直接轧制成材,可大幅度降低生产成本,对推广钛及钛合金的
贵金属纳米材料具有诸多特性(如尺寸效应、量子效应以及界面效应等),在材料、生物技术、环境和能源等领域广受关注。提高贵金属纳米材料的利用率一直是重要的研究课题。本文在简要综述贵金属纳米电催化剂、纳米多孔金属材料与动态氢气泡模板法以及欠电位沉积的基础上,基于动态氢气泡和牺牲金属双模板法制备了三维蜂窝状AuPt贵金属修饰电极,基于金属欠电位/本体共沉积法制备了PtAu贵金属修饰电极,并研究了这些修饰电极
非酒精性脂肪性肝病(N on-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指一种无过量酒精摄入或遗传易感导致的肝脏实质性的病理学改变,它能够进一步发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝硬化、肝细胞癌、肝功能衰竭。研究表明,NAFLD还与多种代谢性疾病密切相关,如中央肥胖、慢性肾脏疾病(CKD)、2型糖尿病(T2DM)、高血压、心血管疾病等。目前,临床上对于NAFLD
食蟹猴与人类生理、遗传学和行为方面有着密切关系,是生物医学研究中重要的非人灵长类实验动物之一。非人灵长类种质资源的保存十分重要,精子的低温冷冻保存在珍稀动物遗传多样性、迁地保护、人工繁殖发挥着重要作用。遗传特性更接近人类的的精子对低温环境表现得特别敏感,目前还缺乏基于无卵黄冷冻液的优化灵长类精子保存方法。因此,仍需优化冷冻保存方法提高冷冻复苏后精子的存活率。本研究以食蟹猴为实验对象,基于实验室先前