抗仔猪腹泻中药复方的作用机理研究

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中药丰富的物质基础决定其良好的抗仔猪腹泻作用功效,解决了抗生素带来的耐药性和残留问题。通过适当的配伍所得的中药复方能显著提高药效,近些年来抗仔猪腹泻作用的中药复方大量涌现,但在机理研究方面存在研究方法单一或研究不全面等问题。本研究在阅读大量文献的基础上选择了5个抗仔猪腹泻作用的中药复方,分别对其进行了水提和醇提,创新性的通过体外的方法研究了中药复方提取物的抗氧化作用,并采用药敏实验探讨了其对病原微生物的抑制作用,突破性的尝试新的体外模拟方法对仔猪胃肠道环境进行模拟,探究中药提取物对仔猪胃肠道菌群的影响,最后应用蓖麻油诱导小鼠腹泻,对抗仔猪腹泻中药的作用效果进行了比较,研究结果显示:  (1)通过体外抗氧化方法测定5个中药复方及组成复方的单一中药对DPPH·和·OH的清除作用,复方2、复方4和复方5的水提物清除DPPH·作用效果相对较好,复方1和复方3的水提物清除·OH作用效果较好,复方5水提物清除·OH作用较弱,中药水提物多糖含量与对DPPH·和·OH的清除作用分别呈中低度正相关和不相关性;复方2及复方5的醇提物清除DPPH·作用效果好,复方3醇提物清除DPPH·作用较差,醇提物黄酮及总多酚含量与对DPPH·的清除作用均呈高度相关性,醇提物中复方1和复方3清除·OH作用效果好,清除作用较差的为复方4;醇提物黄酮及总多酚含量与对·OH的清除作用均呈极低的相关性。一定浓度下,中药复方还表现出协同抗氧化作用。  (2)运用管蝶法探讨实验中药提取物对仔猪腹泻致病菌株——大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果,中药提取物对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌效果表现出较大的差异。复方2水提物和醇提物对大肠杆菌分别呈低度敏感和中度敏感性,复方3和复方5水提物和醇提物对大肠杆菌则都分别呈中度敏感和低度敏感性,复方4提取物对大肠杆菌均为低度敏感,复方1提取物对大肠杆菌不敏感,总体上说复方2、复方3和复方5提取物对大肠杆菌抑制作用相对较好,其次为复方4,复方1没有抑制大肠杆菌作用。复方1和复方3的提取物对沙门氏菌均为低敏感性,复方2的提取物对沙门氏菌均为中度敏感性,复方4和复方5的水提物对沙门氏菌不敏感,但它们的醇提物对沙门氏菌分别呈中和低敏感性,复方2水提物对沙门氏菌的抑菌圈直径大于抗生素处理组,抑制沙门氏菌作用最好。  (3)在普通胃肠道模拟的基础上考虑日粮及残留营养物质因素建立体外仔猪胃肠道发酵模型,分别探讨5个中药复方及在药敏实验中抑菌效果较好的单位中药提取物(白头翁、黄连及防风醇提物,黄芪、防风和黄连水提物)在模拟的仔猪胃肠道环境中对有害菌(大肠杆菌和沙门氏菌)及有益菌(乳酸菌)的影响,结果表明在胃模拟中,复方1和复方4水提物不能有效抑制大肠杆菌,但对沙门氏菌生长均有一定程度的抑制作用,其余中药及中药复方提取物对大肠杆菌和沙门氏菌生长表现出抑制作用;复方1和复方3水提物、复方4醇提物能显著促进胃液中乳酸菌的增长,其余中药复方促进乳酸菌生长作用不显著。空肠模拟中,中药复方对大肠杆菌和沙门氏菌均有显著抑制作用,复方2、复方4的醇提物及复方1、复方5的水提物能显著促进乳酸菌生长,其余复方提取物促进乳酸菌生长作用不显著。抗生素对仔猪肠道有益菌群和有害菌群均表现出抑制作用,不能维持仔猪胃肠道菌群的平衡。  (4)通过人工建立蓖麻油诱导小鼠腹泻模型,综合分析了小鼠灌服蓖麻油后6h的首次腹泻时间、每小时腹泻情况、腹泻频率及腹泻抑制率等指标发现剂量浓度为500mg/kg的复方1、复方4、复方5醇提物及4000mg/kg的复方2水提物在6h内均有很好的抗腹泻效果,复方1和复方3水提物无抗腹泻作用,其余中药复方均有一定程度上的抗腹泻作用,说明除复方1和复方3水提物外其余中药复方提取物都可能一定程度上缓解了蓖麻油酸钠对小肠粘膜的刺激作用,减轻小肠蠕动的强度,缓解腹泻症状。
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