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研究背景长期以来,化疗在妇科恶性肿瘤的治疗中占有重要地位,被视为妇科恶性肿瘤三大主要治疗手段之一。然而,化疗是一把双刃剑:作为全身性的治疗措施,化疗能有效控制恶性肿瘤的生长、扩散和转移,甚至对一些高度敏感的妇科恶性肿瘤,化疗可以达到治愈的效果;另一方面,化疗也可导致严重的毒副反应,如卵巢功能低下和不孕等不可逆的永久损害,严重影响患者的生存质量。因此,在妇科肿瘤的化疗过程中保护患者的生育功能具有十分重要的意义。研究表明:促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对化疗所引起的大鼠卵巢损害有保护作用,GnRHa保存了大部分的初级卵泡,降低化疗药物对大鼠卵巢功能的损害,保护其储备功能,但是化疗过程中应用了GnRHa之后,大鼠的生育功能及其子代的发育有无异常,国内外文献报道较少。曲普瑞林系合成的促性腺激素释放激素(GnRH)的类似物,作用与GnRH相同,其血浆半衰期延长且对GnRH受体的亲和力更强,因此曲普瑞林是GnRH受体的强力激动剂。因此,本实验以此为研究方向,以期待为进一步的临床研究提供一定的实验室依据。目的(1)探讨不同的环磷酰胺剂量对子代胎鼠的影响。(2)探讨GnRHa对化疗大鼠生育功能的保护作用,观察子代胎鼠的内脏和骨骼的发育有无异常。方法(1)将40只大鼠随机分为A、B、C、D、组,每组10只(纳入对象排除因任何原因在实验过程中死亡的大鼠),A组为空白对照组(生理盐水), B组为环磷酰胺(CTX20mg/Kg)组, C组为环磷酰胺(CTX15mg/Kg)组,D组为环磷酰胺(CTX10mg/Kg)组。所有实验大鼠通过腹腔注射给药,连续20日。给药后雌、雄大鼠按2:1比例交配合笼,次日早晨作阴道精子涂片检测以发现阴栓和查到精子为受孕标志,当日作为“受孕”日。于大鼠妊娠第20天直接脱臼处死,剖腹检查吸收胎、死胎及活胎数。活胎鼠检查逐一记录胎仔体重、身长和尾长。(2)将40只大鼠随机分为A、B、C、D、组,每组10只,A组为空白对照组(生理盐水),B组为环磷酰胺(20mg/Kg)组,C组为曲谱瑞林(GnRHa)组,D组为GnRHa+CTX组, GnRHa采用能够最大程度的抑制大鼠卵巢功能的剂量,每只5μg/d连续10日。所有实验大鼠通过腹腔注射给药,连续20日。在给药后雌、雄大鼠按2:1比例交配合笼,次日早晨作阴道精子涂片检测以发现阴栓和查到精子为受孕标志,当日作为“受孕”日。大鼠妊娠第20天直接脱臼处死,剖腹检查吸收胎、死胎及活胎数。活胎鼠检查逐一记录胎仔体重、身长和尾长。通过Bouins固定液和茜素红溶液检查胎鼠内脏和骨骼的发育。结果(1)与对照组比较: CTX剂量组大鼠的体重均有一定程度的下降,其中20mg/KgCTX剂量组的大鼠体重明显减轻(P<0.05),15mg/kg组和10mg/kg组经统计学处理无显著差异(P>0.05)。各实验组与空白对照组比较:窝活胎鼠和吸收胎率均无显著变化(P>0.05),死胎率明显升高。胎鼠的体重、体长、尾长发育指标均无显著性差异(P>0.05)。(2)与空白对照组相比较,CTX组的大鼠体重下降明显,有统计学意义(P<0.05)。CTX实验组出现死胎和吸收胎,其他实验组均未见死胎和吸收胎,死胎率较上一步实验中CTX20mg/kg剂量组的死胎率低,吸收胎率较上一步实验中20mg/kgCTX剂量组的吸收胎率高。与空白对照组相比,各实验组胎鼠的体重、体长、尾长发育指标均未见显著性差异(P>0.05)。四个实验组子代胎鼠的骨骼和内脏未见明显发育异常。结论在这个实验中,20mg/kg的CTX剂量使子代胎鼠出现死胎和吸收胎;曲谱瑞林(GnRHa)先于CTX运用可以降低仔鼠致死率,提示促性腺激素释放激素激动剂在保护卵巢功能的同时可能对于大鼠的生育能力也有一定的保护作用;观察曲谱瑞林组、联合用药组及环磷酰胺组的胎鼠发育外观无明显异常。