论文部分内容阅读
目的:研究白蛋白超载对人肾小管上皮细胞-间充质转化(EMT)、以及对人肾小管上皮细胞糖皮质激素耐药相关因素(P-gp、GRβ)的影响。方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HKC),分别用浓度为5g/L、10g/L、20g/L人血清白蛋白(HSA)刺激HKC细胞48小时,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖情况。用20g/L HSA培养HKC细胞48小时,通过相差显微镜观察HKC细胞形态学变化,同时采用免疫细胞化学方法检测角蛋白(CK)、波形蛋白(vimentin)以及P-糖蛋白(P-gp)、糖皮质激素受体β(GRβ)在HKC细胞中表达的变化,并用计算机图像分析系统对结果进行分析。结果:①与正常对照组比较,5g/L、10g/L和20g/L HSA刺激HKC细胞48小时后,均可促进HKC细胞的增殖(P<0.05),且以20g/L组更为明显(P<0.05);②HKC细胞经白蛋白刺激后,逐渐发生细胞形态的改变,细胞由鹅卵形变为长梭形,类似于成纤维细胞形状;③正常HKC细胞均表达CK、而无vimentin表达,20g/L HSA刺激48小时后,与正常对照组比较,HKC细胞表现为不同程度的CK表达减少和vimentin表达增加(P<0.05);④正常对照组HKC细胞有一定程度的P-gp表达,而几乎不表达GRβ,20g/L HSA刺激HKC细胞48小时后,其P-gp和GRβ表达水平明显增高(P<0.05);⑤相关性分析显示,经白蛋白刺激后,HKC细胞P-gp和GRβ表达水平呈正相关(P<0.01);P-gp与CK表达水平呈负相关,而与vimentin表达水平呈正相关(P<0.01或P<0.05);而GRβ与CK表达水平呈负相关(P<0.05),而与vimentin表达水平无明显相关性(P>0.05)。结论:①白蛋白超载能够刺激HKC细胞增殖并诱导HKC细胞发生上皮细胞-间充质转化(EMT);②白蛋白超载能够诱导HKC细胞高表达P-gp和GRβ;③HKC细胞P-gp和GRβ高表达与HKC细胞EMT之间存在相关性。