小麦全蚀病菌拮抗菌的筛选鉴定及生防制剂的初步研究

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小麦全蚀病是造成各地麦区大量减产的主要真菌病害之一,其传播速度快,破坏性强。目前,施加化学农药是防治小麦全蚀病的主要手段,但由于其可能引发生态环境问题和食品安全问题,这使得微生物制剂防治该病害成为了新的选择。本研究从健康小麦根际土壤中分离并筛选小麦全蚀病菌的拮抗细菌,研究其在离体和活体实验中对小麦全蚀病菌的抑菌活性,优化拮抗细菌的发酵条件,探究其抑菌谱,并初步研制拮抗细菌相关可湿性粉剂。本项研究为人们对小麦全蚀病进行生物防治提供拮抗菌株,并为其能应用于实际生产中提供方法。主要研究结果如下:1.采用梯度稀释法和平板对峙法分离得到小麦全蚀病菌的拮抗细菌12株,其中菌株XJ-3和XJ-4对小麦全蚀病菌的抑制率超过了 60.00%,XJ-4的效果更好。XJ-3和XJ-4能导致小麦全蚀病菌菌丝肿大、畸形,尖端异常,其发酵液的抑制率分别为 70.20%和 74.27%。2.通过对XJ-3和XJ-4的形态特征、生理生化特征值和基于gyrB基因的分子鉴定,鉴定其为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。3.通过单因素实验,得到XJ-3和XJ-4最适宜的生长繁殖温度为28℃,pH值为6.0;XJ-3产生抗菌代谢物的最优发酵条件为33℃、培养基初始pH值为7.0、转速为175 rpm,培养4 d;XJ-4产生抗菌代谢物的最优发酵条件为33℃、培养基初始pH值为7.0、转速为225 rpm,培养5 d。4.通过平板对峙培养实验,XJ-3和XJ-4对炭疽菌属(Colletotrichum)、葡萄孢属(Botrytis)、丝核菌属(Rhizoctonia)、赤霉属(Gibberella)和镰孢属(Fusarium)的供试病原真菌均表现出抑制作用,均具有广谱抑菌活性。5.通过XJ-3和XJ-4的盆栽实验,结果表明,XJ-3和XJ-4对小麦幼苗的生长有促进作用,与对照组相比,株高与干重均增加,XJ-4效果更为明显;XJ-3和XJ-4对接种小麦全蚀病的小麦有明显的防治效果,使用其菌液灌根缓解了发病小麦植株矮化和颈基部、根部发黑的症状,平均防效分别为51.29%和52.46%。6.本研究制备的XJ-3和XJ-4可湿性粉剂含孢量分别为1.23 X 109CFU/g和1.88 X 109CFU/g,润湿时间分别为52 s和50 s,悬浮率分别为78.8%和81.5%,均符合国家标准。
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