【摘 要】
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药用植物中所含的丰富的天然产物可以用于治疗多种疾病,且大多数药用植物都含有内生真菌。研究发现内生真菌与宿主植物互利共生,并且能够产生与宿主植物具有相同或相似生物活性的次级代谢产物。因此,本文从选用的四种药用植物中分离纯化出内生真菌,并对其进行活性初探,旨在得到具有某种生物活性的提取物,从而进行活性成分的分离。研究内容和结果如下:1、内生真菌的分离纯化:将栓翅卫矛（Euonymus phelloma
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药用植物中所含的丰富的天然产物可以用于治疗多种疾病,且大多数药用植物都含有内生真菌。研究发现内生真菌与宿主植物互利共生,并且能够产生与宿主植物具有相同或相似生物活性的次级代谢产物。因此,本文从选用的四种药用植物中分离纯化出内生真菌,并对其进行活性初探,旨在得到具有某种生物活性的提取物,从而进行活性成分的分离。研究内容和结果如下:1、内生真菌的分离纯化:将栓翅卫矛（Euonymus phellomanus.）,甘西鼠尾草（Salvia przewalskii.）,刺五加（Acanthopanaxsenticosus.）,黄海棠（Hypericum ascyron.）的根、茎、叶、花中的内生真菌进行组织培养,经过分离纯化以后得到20株内生真菌,其中从黄海棠中分得10株内生真菌,刺五加中分得2株内生真菌,甘西鼠尾草中分得6株内生真菌,栓翅卫矛中分得2株内生真菌。2、活性测定:将纯化得到的内生真菌进行马铃薯-葡萄糖（PDB）、CYM培养基液体发酵、乙酸乙酯萃取、甲醇回流提取等方法获得80个粗提物。对80个粗提物进行抗单胺氧化酶（MAO）活性、抗乙酰胆碱酯酶（Ach E）活性、抗磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）活性、抑菌活性测定。SJ-2、WJ-3、HJ-1的PDB菌液提取物抗MAO活性较强,IC50值分别是:126.64、118.56、221.34μg/m L。粗提物在其他活性测定方面均未表现出好的抑制活性。3、化学成分分析:通过TLC薄层层析、大孔树脂柱层析、MCI柱层层析、硅胶柱层析、高效液相色谱等多种色谱手段从内生真菌WJ-3和SJ-2的化学成分进行分离中分离得到了8个化合物,通过波谱解析方法进行结构鉴定,最终确定6个单体化合物的结构,他们被鉴定为:3-methyl-6,8-dihydroxyisocoumarin（1）、邻苯二酸二丁基酯（2）、Ergosterol peroxide（3）、Enniatin B（4）、Monomethylsulochrin（5）、Fumitremorgin C（6）。其中化合物7样品量太少,故无法解析。4、菌种鉴定:对纯化后的菌株运用形态学特征与分子生物学分析结合的方法进行鉴定,DY-1为附球菌属（Epicoccum sp.）真菌;DY-2为茎点霉属（Phoma sp.）真菌;DY-3、SJ-1、DJ-2、DG-1、WY-1、Hh-1、HG-1、HG-2、HJ-1、HJ-2、HJ-3、HJ-4、HY-1、HY-3鉴定为链格孢属（Alternaria sp.）真菌;Hh-3鉴定为葡萄孢属（Botrytis sp.）真菌;SJ-2鉴定为镰孢属真菌（Fusarium tricinctum）;WJ-3、DJ-1为青霉菌属（Penicillium sp.）真菌。
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