单纯性脑震荡大鼠海马IL-1β的表达及AH6809干预的研究

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[目的]构建单纯性脑震荡(pure cerebral concussion,PCC)大鼠模型,分别观察PCC大鼠及给予EP2受体拮抗剂AH6809干预后的海马脑区IL-1β的表达变化,探讨PCC后大鼠海马脑区IL-1β的表达情况及AH6809的干预调控作用。[方法]采用自制“金属单摆闭合式脑损伤打击装置”将正常清醒状态大鼠构建成PCC模型并随机分为6组:3h、12h、1d、2d、3d和7d组(n = 5),同时另设正常对照组(n = 5)。PCC损伤后给予AH6809进行干预,并将PCC+AH组随机分为1d、2d、3d和7d四组(n = 5),相对应的时间点设置PCC+NS(生理盐水)对照组(n = 5)。分别用免疫组化染色、Western Blotting和RT-PCR实验技术,检测PCC致伤及AH6809干预后海马脑区IL-1β的阳性细胞、蛋白和mRNA时序性表达规律。[结果](一)PCC组(1)免疫组化染色结果显示:正常生理状态下,海马脑区IL-1β阳性细胞染色较浅、轮廓不清。PCC损伤后随时间点推移,海马脑区(CA1~4、DG1~2)各时间点(3h、12h、1d、2d、3d)IL-1β的阳性表达及阳性细胞计数均呈现出逐渐上调趋势,其中3d组达高峰,7d组有所回落。与正常对照组比较,除3h和7d外的四个时间点,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)Western Blotting与RT-PCR实验结果显示:正常对照组海马CA1~4、DG1~2区中的IL-1β蛋白和mRNA表达量均较弱,PCC损伤后随时间的推移,出现表达逐渐增强的趋势,其规律与免疫组化规律相似,其中3d组达表达高峰,7d组有所回落。Western Blotting结果中的3h、12h、1d、2d、3d、7d组以及RT-PCR结果中的1d、2d、3d组与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(二)PCC+AH6809干预组(1)免疫组化染色结果显示:与PCC+NS对照组比,PCC+AH6809干预组各时间点(1d、2d、3d)的IL-1β阳性表达及阳性细胞计数均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Western Blotting实验结果显示:与PCC+NS对照组比,PCC+AH6809干预组各时间点(1d、2d、3d、7d)的IL-1β蛋白表达均不同程度下降,差异有统计学意义(P<0.05);(3)RT-PCR实验结果显示:与PCC+NS对照组比,PCC+AH6809干预组各时间点(1d、2d、3d、7d)的IL-1βmRNA表达均不同程度下降,但其中仅3d组差异有统计学意义(P<0.05)。[结论](1)正常生理状态下,海马脑区分布有IL-1β阳性表达细胞。(2)PCC损伤后IL-1β在海马脑区的表达呈现一定时序性变化规律,证实IL-1β参与了 PCC的继发性病理过程。(3)AH6809对IL-1β的表达有一定的拮抗作用。
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