丹栀逍遥散调节炎性微环境抗乳腺癌及其分子机制的研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:adidas9910
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本实验通过建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,探讨丹栀逍遥散抗乳腺癌的作用及其分子机制,揭示了丹栀逍遥散可能通过调节炎性微环境的途径抗乳腺癌。材料与方法:6周龄SPF级BALB/c雌性裸鼠,适应性喂养7d后,将对数生长期稳转MDA-MB-231-GFP细胞,接种于裸鼠皮下,接种的细胞个数为5×105个。建立肿瘤模型。将接种后的裸鼠随机分为模型组、丹栀逍遥散组(11.69g·kg-1)、西黄丸组(0.78g·kg-1),每组10只,正常对照组10只。乳腺癌细胞接种1d后,进行药物灌胃,按固定的时间灌服1次/d,连续给药22d,正常对照组、模型组给予等量的生理盐水进行灌胃。末次给药2h后,摘除眼球取血并按常规方法将裸鼠处死,剥离肿瘤组织,称取肿瘤质量并计算肿瘤质量抑制率,并进行后续实验。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察裸鼠移植瘤组织的形态学改变。酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测丹栀逍遥散对乳腺癌裸鼠血浆中低氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)、巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory,MIF)含量的影响。免疫组化法检测丹栀逍遥散对肿瘤组织中HIF-1α、MIF、单羧酸转运蛋白1(Monocarboxylate transporter 1,MCT1)、单羧酸转运蛋白4(Monocarboxylate transporter4,MCT4)蛋白表达的影响。免疫印迹法(Western blot)检测丹栀逍遥散对肿瘤组织中MIF、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、MCT1、MCT4、赖氨酰氧化酶(Lysyl Oxidase,LOX)、血管内皮生长因子A(Vascular endothelial growth factor,VEGF-A)、血管内皮生长因子受体2(Vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2)蛋白表达的影响。结果:1.丹栀逍遥散对乳腺癌裸鼠移植瘤质量的影响结果显示,与模型组相比,丹栀逍遥散组肿瘤质量显著下降(P<0.01),肿瘤质量抑制率为26.17%。说明丹栀逍遥散能够有效抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长。2.丹栀逍遥散对肿瘤组织形态的影响HE结果显示,显微镜下模型组中肿瘤细胞排列密集,并呈现不规则的条索状或团块状分布,肿瘤细胞可见异型性,细胞核增大呈圆形或卵形,颜色呈深染,有少量细胞坏死灶散在分布。与模型组相比,丹栀逍遥散组、西黄丸组中肿瘤细胞呈不同程度退行性改变,肿瘤组织坏死灶明显增加。3.丹栀逍遥散对乳腺癌裸鼠血浆中HIF-1α、MIF含量的影响ELISA结果显示,与正常对照组相比,模型组中乳腺癌血浆中HIF-1α、MIF的含量上升(P<0.01);与模型组相比,丹栀逍遥散组中乳腺癌血浆中HIF-1α、MIF的含量下降(P<0.01),西黄丸组中乳腺癌血浆中HIF-1α、MIF的含量下降(P<0.01)。说明丹栀逍遥散能够降低乳腺癌血浆中HIF-1α、MIF的含量。4.丹栀逍遥散对肿瘤组织中HIF-1α、MIF、MCT1、MCT4蛋白表达的影响免疫组化结果显示,与正常对照组相比,模型组HIF-1α、MIF、MCT1、MCT4阳性表达增强(P<0.01),与模型组相比,丹栀逍遥散组HIF-1α、MIF、MCT1、MCT4阳性表达减弱(P<0.01),西黄丸组HIF-1α、MIF、MCT1、MCT4阳性表达减弱(P<0.01)。说明丹栀逍遥散能够降低肿瘤组织中HIF-1α、MIF、MCT1、MCT4的表达水平。5.丹栀逍遥散对肿瘤组织中MIF、IL-6、IL-8、MCT1、MCT4、LOX、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达的影响Western blot结果显示,与正常对照组相比,模型组MIF、IL-6、IL-8、MCT1、MCT4、LOX、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达均升高(P<0.01);与模型组相比,丹栀逍遥散组MIF、IL-6、IL-8、MCT1、MCT4、LOX、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达均降低(P<0.01);与模型组相比,西黄丸组MIF、IL-6、IL-8、MCT1、MCT4、LOX、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达均降低(P<0.01)。结论:1.丹栀逍遥散能够有效抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长。2.丹栀逍遥散能够下调肿瘤组织内HIF-1α、MIF、IL-6、IL-8、MCT1、MCT4、LOX、VEGF-A、VEGFR-2蛋白的表达,提示丹栀逍遥散可能通过调控肿瘤微环境,抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长,可能主要与其调节炎性微环境并调节乳腺癌代谢微环境、低氧微环境及血管生成有关。
其他文献
目的:评价采用祛风化痰方治疗儿童上气道咳嗽综合征(风痰证)的临床疗效,为治疗该疾病的患儿提供临床用药依据和方法。资料与方法:收集从2018年2月到2019年12月于本院就诊同时确诊患有儿童上气道咳嗽综合征(风痰证)的70例患儿,通过简单随机化分组方式划分成两组,即治疗组与对照组,每组各有35例。治疗组和对照组分别采用口服祛风化痰止咳方和西医疗法治疗。单个疗程时间为1周,持续治疗两个疗程之后对疗效进
分布式驱动电动汽车的每个车轮都能够独立驱动、独立转向,相对于传统汽车在底盘控制上具有更多自由度的显著优势,有利于提高汽车的操纵稳定性,在汽车布置形式上具有重要意义。对于操纵杆式线控转向系统,驾驶员通过控制操纵杆摆动,能够让驾驶员在操纵汽车转向时,更加直观的感受转向反馈,降低车辆转向操纵的复杂程度,提高车辆舒适性,减缓驾驶员的疲劳产生时间。操纵杆式线控转向分布式驱动电动汽车,在控制方面将与传统转向盘
目的:本研究以糖尿病小鼠皮肤溃疡模型为研究对象,观察湿润烧伤膏对模型小鼠皮肤愈合情况的影响,并通过皮肤肉芽组织细胞凋亡及组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平的检测,探讨湿润烧伤膏对糖尿病小鼠皮肤溃疡创面愈合作用机理,为临床治疗糖尿病皮肤溃疡提供实验依据。材料与方法:昆明种SPF级雄性小鼠40只,随机分为4组,分别是空白对照组、模型对照组、康复新液组、湿润烧伤膏组
目的:由于睡眠的好坏影响着人们的日常生活和工作学习,临床上睡眠障碍类疾病也比较常见,随着时代更迭,甚至日益增多。而《内经》中营卫理论又与睡眠有着不可忽略的关系,对后世起着指导性作用。基于临床上对治疗睡眠障碍的需要,着手对各年代医家理论思想的整理,并思考探究营卫理论治疗睡眠障碍的诊治规律,以此为临床提供理论支撑。本文全面搜集和系统整理《内经》中及其注家及其他医家中营卫有关的内容,为从营卫理论治疗睡眠
当归四逆汤最早见于《伤寒论》,但一直以来对于当归四逆汤方证的解释多停留于血虚寒凝,论述不细致,本文的目的在于重新梳理并深入分析当归四逆汤证的病因病机,组方机理及临床应用规律,补前人之不足。本文以宋本《伤寒论》及桂林古本《伤寒论》之当归四逆汤为研究对象,结合其他古代及近现代文献进行归纳、整理、分析。论文的第一部分研究病因;第二部分研究病机,及其所属的病理产物及病位以完善病机全貌;第三部分分析条文症状
目的:本研究以中医气血理论为支撑,将糖尿病心肌病“气虚血瘀”病机与现代分子生物学相结合,应用高糖诱导大鼠心肌成纤维细胞构建糖尿病心肌病细胞模型,通过观察TGF-β1/Smads信号通路相关因子的表达,研究该通路与糖尿病心肌纤维化的相关性,及益气活血法对糖尿病心肌病的作用机制,以期为中医药防治该病提供理论依据。材料与方法:复苏及传代培养大鼠心肌成纤维细胞,随机分为6组:对照组、模型组、缬沙坦组及益气
《伤寒论》系统的论述了外感病的理法方药,形成了六经辨证体系,是后世医家尊奉诊治外感病的一般大法。六经辨证方法,是张仲景学术思想之精髓,研究者代不乏人。柯琴是清代著名伤寒学家,毕生研习中医经典古籍,对《伤寒论》有深入研究,以其著作《伤寒来苏集》最具代表性,其在六经辨证学术思想上多有创新,丰富发展了《伤寒论》之六经辨证体系。在经过对大量文献的总结归纳发现,目前对柯琴六经辨证学术思想缺乏系统的整理,研究
目的:基于NF-κB信号通路,通过观察Forskolin(c AMP激活剂)、PDTC(NF-k B抑制剂)、抑制剂H89(PKA抑制剂)和麻黄细辛附子汤对于变应性鼻炎大鼠p-CREB、AQP5、NF-κBp65表达的影响,深入研究麻黄细辛附子汤治疗AR的作用中对p-CREB、AQP5、NF-κBp65表达的影响,探讨麻黄细辛附子汤对AR的作用机理,为阳气虚弱、水饮内停这一变应性鼻炎的中医病机提供
目的:研制气滞证中医疗效评价量表,对量表的可行性、信度、效度及反应度进行考评;为气滞证单一证候的研究提供参考指标,为气滞证患者的自我诊断及疗效评价提供相对准确统一的量化工具;为其它单一证候中医疗效评价量表的研制总结经验与方法;为病证结合量表、证证结合量表提供特异性模块。材料与方法:参照FDA国际量表研制指南与课题组量表研制经验,成立研究小组,通过文献回顾、标准收集、教材梳理、患者访谈及议题小组讨论
目的:基于中医“气化”理论,探讨疏肝健脾方丹栀逍遥散对乳腺癌细胞能量代谢的影响及作用机制,为丹栀逍遥散抗乳腺癌提供实验依据。材料与方法:1.观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、细胞迁移、细胞周期、细胞凋亡的影响制备丹栀逍遥散含药血清。将30只SD大鼠分为空白对照组、丹栀逍遥散组、西黄丸组,每组10只。丹栀逍遥散8.99 g·kg-1,西黄丸0.55 g·kg-1,空白对照组