第一部分大鼠原位肝移植模型的建立目的：用改良二袖套法建立稳定可靠的大鼠原位肝脏移植模型,为下一步大鼠DCD肝移植提供前提条件。方法：1实验大鼠均为健康的SD大鼠,体重250-280g,供体为雌性,受体为雄性,供、受体体重相差10g左右,一般为供体体重比受体体重轻。2结合实践,在取肝、受体麻醉、肝上下腔静脉的吻合、围手术期的处理等几方面对传统的二袖套法进行改良,共施行大鼠原位肝移植动物实验100例,观察术后并发症及存活率。结果：经过100例次的训练,建立了稳定的大鼠原位肝移植模型。在实验的第二阶段,受体平均无肝期为13分钟,受体手术时间为50分钟,手术成功率90%,两周存活率88%。结论：改良的二袖套法具有无肝期短、手术成功率高、大鼠术后存活时间长的优点,是大鼠原位肝移植的理想术式。第二部分两种药物联合供肝灌注保存对大鼠DCD肝移植的影响目的：前列地尔(PGE1)与三七总皂甙(PNS)广泛参与肝脏生理病理调节,具有改善血流,保护肝细胞,调节免疫反应等多方面功能,已经在临床肝移植中得到了广泛的应用。国内外不少研究机构都进行了PGE1与PNS对肝脏保护作用的研究,但却少有在大鼠DCD肝移植模型中应用的报道。本实验通过PGE1与PNS供肝灌注保存对大鼠DCD肝移植缺血再灌注损伤的影响,进一步提高器官灌注保存液的效果和质量.方法：大鼠术前禁食12h,自由进水,乙醚麻醉后,取仰卧位,腹部十字切口进腹,经阴茎背静脉注入肝素800IU/ml 1ml,完成大鼠肝素化,取胸骨旁两侧切口行开胸手术,左侧分离夹闭胸主动脉,右侧用血管钳夹闭心脏基底部致使心脏停搏,造成无心跳供体(DCD)的供肝模型,并开始计时。实验动物分为五组：实验组1：前列地尔加肝素加乳酸钠林格灌注保存,热缺血时间30min；实验组2：三七总皂甙加肝素加乳酸钠林格灌注保存,热缺血时间为30min；实验组3：前列地尔联合三七总皂甙加肝素加乳酸钠林格灌注保存,热缺血时间为30min。空白对照组：乳酸钠林格加肝素灌注保存,热缺血时间为0min；阴性对照组：乳酸钠林格加肝素灌注保存,热缺血时间为30min；手术后24小时检测各组胆汁分泌情况,切取肝脏组织,HE染色病理检查,westernblot及免疫组化检测核因子(NF-κB)及凋亡蛋白(BCL-2),术后不同时间检测各组血浆中ALT,AST水平,另取对照组及实验组观察其术后生存率,并绘制生存曲线。结果：同一时间点检测各项指标；1酶学指标：与阴性对照组相比,三组实验组术后ALT, AST值均明显降低。实验组1,2无明显差异,但较实验组3稍高,空白对照组最低。2核因子(NF-κB)及凋亡蛋白(BCL-2)：与阴性对照组相比实验组凋亡蛋白(BCL-2)较高,实验组1,2无明显差异,但较实验组3稍低,空白对照组最高。3肝脏病理检测：与阴性对照组相比,三组实验组肝脏组织学的改变明显减轻,实验组3较实验组1,2相比有所减轻,实验组1,2无明显差异,空白对照组改变最少。4胆汁分泌情况：实验组3胆汁分泌量明显高于阴性对照组,实验组1,2胆汁分泌量无明显差异,稍高于阴性对照组,空白对照组胆汁分泌量最多。5术后生存率：实验组1,2术后生存率无明显差异,高于阴性对照组,低于实验组3和空白对照组,空白对照组最高。结论：本实验中发现,前列地尔联合三七总皂甙灌注保存能够较阴性对照组明显减轻细胞凋亡率,缓解细胞肿胀,降低组织水肿,减少汇管区炎症细胞的浸润,减轻肝细胞的损害,使肝细胞的活力延长,在较长时间内肝细胞仍能保持形态学的完整和功能的正常,从而减轻肝脏缺血再灌注损伤,对移植肝有一定的保护作用,能改善大鼠DCD肝移植术后生存率。