低浓度七氟烷吸入通过iNOS/sGC信号通路对肺动脉高压大鼠循环功能影响的研究

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目的:应用腹腔单次注射野百合碱建立大鼠肺动脉高压模型,观察低浓度七氟烷梯度吸入对肺高压大鼠及正常大鼠血流动力学的影响,探讨iNOS/sGC信号通路在肺动脉高压模型中的作用,以及在低浓度七氟烷梯度吸入对肺动脉高压大鼠循环功能影响中的作用。方法:1.肺动脉高压模型的建立:雄性SD大鼠30只随机分成2组(11=15):肺高压组(M组)、正常对照组(C组)。①M组:腹腔单次注射野百合碱60mg。②C组:注射等量溶剂。饲养28天后,两组大鼠分别进行开胸手术,采集血流动力学数据90min,观察血流动力学的改变;计算大鼠右室/左室重量及厚度比值的改变;HE染色法观察肺组织形态。2.低浓度七氟烷梯度吸入对肺动脉高压及正常大鼠血流动力学的影响:雄性SD大鼠75只随机分成2组:肺高压组(M组,n=45)、正常对照组(C组,n=30),建模方法同前,饲养28天后分两批行开胸手术,分别梯度吸入0.5%,1%,1.5%浓度的七氟烷,观察不同浓度七氟烷吸入对大鼠血流动力学的影响及对两组大鼠血流动力学影响的区别。3.免疫印迹法检测右室心肌iNOS及sGC的表达:western blot方法检测各组大鼠右室心肌iNOS及sGC表达的水平。结果:1.肺动脉高压模型的建立:①血流动力学:M组大鼠mPAP高于C组(P<0.05)。②M组大鼠右室厚度及重量明显高于C组(P<0.05)③HE染色:C组大鼠肺动脉正常;M组大鼠肺血管管壁较C组大鼠明显增厚,血管管腔减小,周围炎性细胞浸润,部分小动脉有血栓形成阻塞管腔。2.低浓度七氟烷梯度吸入对肺动脉高压及正常大鼠血流动力学的影响:①随七氟烷吸入浓度的递增,M组大鼠平均肺动脉压、心率、dp/dtmax、平均体循环压逐渐下降,CO、EF、SV在吸入浓度为0.5%时上升,浓度递增后下降,C组大鼠变化趋势与M组大鼠大致相同。②肺动脉高压大鼠在吸入七氟烷的情况下每搏量、心输出量、心肌收缩力及心率指标均优于正常组大鼠,肺高压大鼠能更好的耐受七氟烷吸入;3.免疫印迹法监测右室心肌iNOS及sGC的表达:①M组右室心肌组织iNOS表达较C组显著增高(P<0.05);②低浓度七氟烷梯度吸入上调心肌组织iNOS表达(P<0.05);③M组中,sGC的表达随七氟烷吸入浓度的升高递减(p<0.05)而C组中sGC的表达与吸入七氟烷的浓度无明显关系(P>0.05)。结论:1.60mg/Kg的野百合碱单次腹腔注射可成功诱导雄性SD大鼠肺动脉高压;2.低浓度七氟烷梯度吸入抑制肺高压大鼠和正常大鼠循环功能,肺高压大鼠较正常大鼠更能耐受七氟烷吸入;3.随七氟烷吸入浓度增加而出现的肺动脉高压大鼠右室心肌sGC表达下降,这可能是肺动脉高压大鼠较正常大鼠更能耐受低浓度七氟烷梯度吸入的机制之一。
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