五唇兰的快速繁殖和多倍体资源创建

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五唇兰因其株型矮小、色彩艳丽、花期长,深受人们喜爱,具有广阔的市场前景。研究五唇兰快速繁殖和多倍体创建技术对推动五唇兰育种和产业发展具有重要意义。本文以花梗腋芽和试管苗叶片为材料,研究了影响五唇兰丛生芽诱导、增殖和分化的因素以及秋水仙素处理对丛生芽增殖、分化和多倍体诱导的影响,旨在建立五唇兰快速繁殖技术体系和多倍体资源创建技术体系。主要研究结果如下: 1.用0.1%升汞对五唇兰花梗消毒5 min后,再用0.1%升汞消毒8 min,无菌花梗存活率为42.05%。6—BA和NAA对花梗腋芽的诱导率有明显影响。当6—BA为2.0 mg/L,NAA为0.5 mg/L时,诱导率为100%,不加任何外源激素时花梗腋芽的诱导率为80%。6—BA和NAA对丛生芽增殖影响显著,在MS+6—BA5.0 mg/L+NAA1.0 mg/L培养基上丛生芽的增殖系数为2.55;TDZ和2,4—D对丛生芽增殖影响显著,在MS+TDZ1.0 mg/L+2,4—D1.0mg/L诱导的丛生芽增殖系数最高为7.54,但丛生芽出现玻璃化。L16(45)的正交实验结果表明,有机附加物对芽增重率的影响最大,防褐化剂、蔗糖、pH次之,基本培养基的影响最弱;最佳壮芽的培养基为1/3MS+6—BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+土豆汁100g/L+蔗糖30 g/L+AC0.5 g/L,pH5.6。L9(34)正交实验结果表明,基本培养基对生根率的影响最大,其次为多效唑和蔗糖,外源激素的影响最小;多效唑对生根数的影响最大,其次为外源激素和基本培养基,蔗糖的影响最小;基本培养基对最长根长的影响最大,其次为多效唑和外源激素,蔗糖的影响最小;根直径不受这些因素的影响;最佳生根的培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L+蔗糖15 g/L。 2.将快速繁殖获得的五唇兰试管苗叶片接种在1/2MS+6—BA10.0 mg/L+2,4—D1.0mg/L+柠檬酸0.2 mg/L培养基上,愈伤组织诱导率达50.12%。 3.秋水仙素处理抑制五唇兰丛生芽的增殖和分化。浓度越高,处理时间越长,褐化率与死亡率越高。所有秋水仙素处理均诱导出多倍体。当秋水仙碱浓度为0.1%,处理时间为48 h时,第十代多倍体诱导率最高,为80%。二倍体丛生芽的增殖系数显著高于四倍体丛生芽的增殖系数,说明二倍体丛生芽的增殖能力强。二倍体丛生芽和四倍体的丛生芽生根率均为76%,但二倍体丛生芽的生根数及根直径显著小于四倍体。和二倍体相比,五唇兰多倍体植株粗壮、叶片增厚。 通过上述研究,建立了五唇兰的快速繁殖技术体系和多倍体诱导及鉴定技术体系,为加快五唇兰的种苗生产和倍性育种奠定了坚实的基础。
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