鬼针草质量评价方法研究

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鬼针草(Bidens Pilosa L.)是我国民间一种常用中草药,已经有了上千年的药用历史以及广泛的药理活性作用,然而该药材未被中国药典(2015年版)所收载,没有建立起相应的质量标准体系,从而导致该药材在实际使用中混乱不堪,严重阻碍了鬼针草的开发利用。基于以上现状,本课题对鬼针草进行了文献研究;性状鉴别、显微鉴别等生药学研究;针对鬼针草的四种指标性成分(原儿茶酸、芦丁、金丝桃苷和槲皮素)进行了HPLC含量测定;并对10批药材进行了指纹图谱分析;此外还采用GC-MS进行了挥发性成分分析,初步建立了鬼针草质量评价方法,现将研究结果概括如下:
  一、文献研究
  1、古今文献资料表明,现代所用鬼针草和古代所用鬼针草植物来源相同,且在功能主治作用方面具有一致性。
  2、鬼针草化学十分成分复杂,药理活性作用广泛,而国内外研究也多集中在化学成分的分离、鉴定及其活性筛选方面,对其质量评价的研究较少。
  二、生药学研究
  本实验对鬼针草药全草材进行了性状鉴别,对其粉末进行了显微观察,用徒手切片法对鬼针草茎、叶等切片进行显微观察,初步建立了鬼针草质量标准。
  三、鬼针草药材4种成分含量测定
  本实验采用单因素分析法考察了鬼针草药材的最佳提取工艺,为:80%的甲醇提取;料液比为1:40;提取温度为30℃;提取时间为30min;提取方式为超声波提取(功率250W,频率50KHz)。同时,用HPLC法测定了10个不同产地鬼针草药材中原儿茶酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素的含量。结果表明:各产地药材该四种化合物含量差异较大;其中广西产鬼针草芦丁、金丝桃苷、槲皮素含量最高,分别为0.901mg·g-1、0.812mg·g-1、0.682mg·g-1。如果以该三种成分作为药材质量优劣判断的指标,则可以认为广西产鬼针草质量最好。
  四、HPLC指纹图谱研究
  本实验对10批鬼针草药材进行HPLC指纹图谱研究,所得图谱导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”,计算相似度。结果发现:鬼针草HPLC指纹图谱发现有15个共有峰,其相对保留时间RSD值均小于3%,则说明其成分大体一致。但是各共有峰的相对保留面积差异较大,表明各样品化学成分含量差异较大,因此10批鬼针草药材相似度较低。这与含量测定结果相符合则说明所建立的鬼针草指纹图谱稳定性较好,结果可靠,所建立鬼针草药材HPLC指纹图谱方法可以为鬼针草质量控制提供依据。
  五、鬼针草化学成分分析
  本实验采用水蒸气蒸馏法提取鬼针草挥发油部分,用GC-MS对其进行分析,共鉴定出了33个化合物,如柠檬烯,石竹稀,二十二烷等,其中相对含量最高的是2-氨基-6-甲基苯并噻唑(65.47%)。而苯并噻唑衍生物属于含氮杂环化合物,其广泛的生物活性而倍受关注。而民间使用鬼针草治疗红肿和过敏是否和该成分有关,有待于进一步研究。
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