论文部分内容阅读
犬细小病毒病是一种犬急性、烈性、高度接触性感染的传染病,犬的发病率很高,尤其是幼犬,对我国养犬业发展造成严重的危害。目前国内对犬细小病毒病的治疗主要依靠抗体,配合以辅助治疗,但抗体价格昂贵,因此,迫切需要寻找一种辅助甚至代替抗体的药物材料。凹凸棒粘土具有黏膜保护性及强大的吸附能力,可以吸附肠道病毒、细菌及毒素等有害物质。微量元素铜、铬对动物的生产发育也有着密切的联系。本试验将三者的优点结合起来,制备载铜载铬凹凸棒粘土,并将其应用到犬细小病毒病的临床治疗中,对其疗效进行评价,为得到价格低廉的抗细小病毒药物提供理论依据。本试验首先对疑似感染细小病毒(CPV)的粪便进行采集,经CPV快速检测试剂条检测呈阳性,经过处理后,同步接毒法接种到猫肾细胞(F81)上,进行病毒分离与增殖,通过血凝(HA)试验、PCR检测对分离病毒进行鉴定。感染犬细小病毒的猫肾细胞会产生明显、稳定的细胞病变;提取CPV病毒液的DNA,通过PCR法扩增得到大小为583bp的目的片段;病毒液可使猪红细胞凝集,血凝价为210,说明CPV分离成功。同时采用离子交换法制备载铜载铬凹凸棒粘土。分别在最佳条件下制备了单独载铜、单独载铬、先载铜后载铬、先载铬后载铜凹凸棒粘土,消解后用ICP光谱仪测定铜离子与铬离子的承载量。结果显示:同时载两种离子时,先载铜后载铬所承载的离子总量大于先载铬后载铜,所以本试验采用先载铜后载铬的方法得到载铜载铬凹凸棒粘土。将分离与鉴定的犬细小病毒,经F81细胞扩增,剂量为5mL10-4.14TCID50,经皮下接种于8只40～60日龄健康CPV阴性的中华田园犬。阴性对照组不做处理,阳性对照组只做辅助治疗,3组试验组分别以低、中、高剂量灌服载铜载铬凹凸棒粘土,每日2次,辅以辅助治疗。每天观察其临床症状并计分。结果显示:在接种CPV后3～4天,犬开始出现呕吐、轻度腹泻、精神抑郁等症状,经CPV快速诊断呈阳性。阳性对照组分别在接毒后第4天、第7天死亡,呕吐、腹泻程度最高,临床计分亦最高;低剂量组分别在感染后第7天、第9天死亡,临床计分分数不断上升但比阳性对照组迟缓;中剂量组和高剂量组均好转,临床计分随感染天数的推移呈先上升后下降趋势。剖检观察发现无论是阳性对照组还是低剂量组均可见小肠损伤严重,肠系膜淋巴结充血、肿胀;中剂量组、高剂量组肠管内外表面未见出血点,肠系膜淋巴结也未见眼观异常。小肠组织病理切片结果显示阳性对照组与低剂量组肠绒毛严重萎缩,有大量的炎性细胞浸润,粘膜下层、肌层充血、出血;而中剂量组和高剂量组肠绒毛排列整齐。