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背景：
乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)是嗜肝DNA病毒科家族中的一员。HBV感染与急慢性肝炎、肝硬化和肝癌的发生发展息息相关，据统计，全球约有2.57亿慢性乙肝感染患者，约有25%的慢性乙肝携带者最终发展成肝硬化、肝癌等严重肝病，每年约有超过68万人死于HBV感染相关的各种终末期肝病。临床数据表明，相较于HBsAg滴度低的患者，HBsAg滴度高的患者患肝细胞肝癌(HCC)风险更高；此外，相比于HBVDNA病毒载量的下降、肝功的恢复等指标，HBsAg的清除与药物疗效和疾病预后的联系更加明确。因此，临床上将持续的HBsAg丢失，作为功能性治愈的指标。目前批准的HBV治疗药物包括干扰素和核苷类似物。其中，干扰素可以提高抗HBV的免疫应答，核苷类似物如恩替卡韦(ETV)可以抑制病毒的逆转录过程，从而有效地抑制HBVDNA的复制。但干扰素副作用大，治疗费用昂贵，核苷类似物需终生服药，易产生耐药性。并且，仅有少数病人经干扰素和/或核苷类似物的治疗后实现表面抗原的阴转。因此，筛选研发靶向乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的新型抗病毒药物，降低HBsAg水平，阻止乙型肝炎病毒感染相关的肝炎、肝硬化和肝癌等疾病的发生发展，是当前乙型肝炎治疗的主要任务之一。
目的：
筛选新的靶向HBsAg的化合物，研究该化合物对HBsAg的抑制作用以及对HBV复制的影响，为临床上慢性乙肝功能性治愈提供可选择的帮助。
方法：
1.在HepG2.2.15细胞系中筛选有效降低HBsAg的化合物。
2.在HBV表达细胞系HepG2.2.15细胞中，通过ELISA，real-timePCR，westernblot，southernblot等实验验证该化合物对HBV的影响，包括对HBsAg，HBeAg，HBVcoreDNA的影响。恩替卡韦作为阳性对照。
3.在HBV感染细胞系统HepG2-NTCP细胞中，通过与核苷类似物恩替卡韦联合用药，验证该化合物与恩替卡韦联用是否可以在抗HBV中发挥协同作用。
4.采用水动力注射prcccDNA/pCMV-KRAB-Cre质粒构建HBV复制小鼠模型，在该小鼠模型中周期给药，并通过动态监测肝毒性、HBV相关指标等，验证该化合物体内使用的安全性、抗HBV的有效性。
结果：
1.在本研究中，川陈皮素(nobiletin)因其低细胞毒性和高抗病毒活性，从1500个化合物中筛选出。
2.在HBV表达细胞系HepG2.2.15细胞中，川陈皮素呈时间依赖性及浓度依赖性地降低HBsAg、HBeAg及HBVDNA的水平。
3.在HepG2-NTCP细胞系中，川陈皮素可以与恩替卡韦发挥协同作用，从而增强对HBsAg、HBeAg以及HBVDNA的抑制作用。
4.在体内进一步验证川陈皮素的抗病毒能力：川陈皮素能显著降低体内HBsAg水平以及HBVDNA水平，而恩替卡韦仅能抑制HBVDNA的水平却不能有效降低HBsAg水平。但通过川陈皮素与恩替卡韦的联合使用，可进一步降低HBVDNA和HBsAg水平
总结：
川陈皮素是一种新型的抑制乙肝病毒表面抗原和乙肝病毒复制的小分子化合物，本研究可为开发新型抗HBV药物提供参考。
乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)是嗜肝DNA病毒科家族中的一员。HBV感染与急慢性肝炎、肝硬化和肝癌的发生发展息息相关，据统计，全球约有2.57亿慢性乙肝感染患者，约有25%的慢性乙肝携带者最终发展成肝硬化、肝癌等严重肝病，每年约有超过68万人死于HBV感染相关的各种终末期肝病。临床数据表明，相较于HBsAg滴度低的患者，HBsAg滴度高的患者患肝细胞肝癌(HCC)风险更高；此外，相比于HBVDNA病毒载量的下降、肝功的恢复等指标，HBsAg的清除与药物疗效和疾病预后的联系更加明确。因此，临床上将持续的HBsAg丢失，作为功能性治愈的指标。目前批准的HBV治疗药物包括干扰素和核苷类似物。其中，干扰素可以提高抗HBV的免疫应答，核苷类似物如恩替卡韦(ETV)可以抑制病毒的逆转录过程，从而有效地抑制HBVDNA的复制。但干扰素副作用大，治疗费用昂贵，核苷类似物需终生服药，易产生耐药性。并且，仅有少数病人经干扰素和/或核苷类似物的治疗后实现表面抗原的阴转。因此，筛选研发靶向乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的新型抗病毒药物，降低HBsAg水平，阻止乙型肝炎病毒感染相关的肝炎、肝硬化和肝癌等疾病的发生发展，是当前乙型肝炎治疗的主要任务之一。
目的：
筛选新的靶向HBsAg的化合物，研究该化合物对HBsAg的抑制作用以及对HBV复制的影响，为临床上慢性乙肝功能性治愈提供可选择的帮助。
方法：
1.在HepG2.2.15细胞系中筛选有效降低HBsAg的化合物。
2.在HBV表达细胞系HepG2.2.15细胞中，通过ELISA，real-timePCR，westernblot，southernblot等实验验证该化合物对HBV的影响，包括对HBsAg，HBeAg，HBVcoreDNA的影响。恩替卡韦作为阳性对照。
3.在HBV感染细胞系统HepG2-NTCP细胞中，通过与核苷类似物恩替卡韦联合用药，验证该化合物与恩替卡韦联用是否可以在抗HBV中发挥协同作用。
4.采用水动力注射prcccDNA/pCMV-KRAB-Cre质粒构建HBV复制小鼠模型，在该小鼠模型中周期给药，并通过动态监测肝毒性、HBV相关指标等，验证该化合物体内使用的安全性、抗HBV的有效性。
结果：
1.在本研究中，川陈皮素(nobiletin)因其低细胞毒性和高抗病毒活性，从1500个化合物中筛选出。
2.在HBV表达细胞系HepG2.2.15细胞中，川陈皮素呈时间依赖性及浓度依赖性地降低HBsAg、HBeAg及HBVDNA的水平。
3.在HepG2-NTCP细胞系中，川陈皮素可以与恩替卡韦发挥协同作用，从而增强对HBsAg、HBeAg以及HBVDNA的抑制作用。
4.在体内进一步验证川陈皮素的抗病毒能力：川陈皮素能显著降低体内HBsAg水平以及HBVDNA水平，而恩替卡韦仅能抑制HBVDNA的水平却不能有效降低HBsAg水平。但通过川陈皮素与恩替卡韦的联合使用，可进一步降低HBVDNA和HBsAg水平
总结：
川陈皮素是一种新型的抑制乙肝病毒表面抗原和乙肝病毒复制的小分子化合物，本研究可为开发新型抗HBV药物提供参考。