无蹼壁虎雌激素受体αmRNA的分子克隆和组织分布

来源 :安徽师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:breeze001
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雌激素(E)是由所有脊椎动物内分泌系统产生的一种重要类固醇性激素,参与了包括爬行动物(reptiles)在内的脊椎动物的许多方面的生理生命活动。  雌激素爬行动物的生殖器官的性别分化和发育起着很大作用(Crew,1996;Devlin and Nagahama,2002)。对于某些温度决定性别(TSD)的爬行动物而言,雌激素水平高低对胚胎性别发育起着关键的作用,但是雌激素对爬行动物性别分化作用的机理现在仍然很模糊,很大一部分原因是在于缺乏对爬行动物雌激素受体的分子生物学方面的研究。除了在爬行动物的生殖生理以及胚胎性别分化发育上,目前还不知道雌激素的作用范围有多广泛?大量研究表明:雌激素同样影响着其他组织的生理活动,例如肝脏,心脏,肺和脑等。  为了探究雌激素在爬行动物中的作用机理,我们从无蹼壁虎(GekkoSwinhonis)卵巢组织中分离出雌激素受体-α(ERα)并进行测序,结果发现:将所得包括D-domain、LBD和大部分的F-domain序列与其它物种相关序列比较可得到,LBD的保守性在跟其它爬行物种相比非常高,与蜥蜴目豹斑虎(Eulepharis macularius)的相似度达93%;爬行动物中有鳞类蜥蜴目进化分歧最大,鳄类ERα同源性最好;在TSD爬行动物中雌激素起着重要作用,可能存在TSD进化体系。  为了更好理解ER对在爬行动物中各种组织的分布及生理作用,用RT-PCR方法、免疫组织化学方法检测了ERα的分布情况。RT-PCR结果表明:成年无蹼壁虎的端脑和间脑、卵巢、输卵管都有较高的表达;在心脏、肝脏和肺的表达电泳条带很弱;在精巢中没有表达。免疫组织化学研究表明:在肝脏、心脏和肺, ERα棕黄色阳性物质沉淀在细胞核,少量的胞浆着色存在于端脑中,精巢也发现了胞浆着色的细胞;但是卵巢没有蛋白的表达。提示:雌激素在无蹼壁虎的各种组织中存在分子和蛋白水平的表达,且卵巢中ERα蛋白的表达可能伴随繁殖期存在周期性表达。
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