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目的：课题组前期采用cDNA基因芯片技术（Agilent人类全基因组表达谱芯片技术）已经筛选出EB病毒诱导淋巴细胞转化过程中可能具有关键作用的4个分子，分别是E2F1、PLK1、BIRC5、PTPN11。本实验通过实时定量PCR和Westernblot技术检测转化淋巴母细胞及其配对的正常人淋巴细胞中E2F1、PLK1、BIRC5及PTPN11表达差异情况，进一步验证前期基因芯片结果，为研究EB病毒诱导淋巴细胞转化的分子机制提供实验依据。方法：从5例健康成人外周静脉血中分离出淋巴细胞，在体外利用EBV诱导B淋巴细胞转化建立永生化的淋巴母细胞系。提取转化淋巴母细胞及其配对的健康人淋巴细胞的总RNA和总蛋白，应用实时定量PCR和Western blot方法，分别检测E2F1、PLK1、BIRC5及PTPN11基因在5例转化淋巴母细胞及其匹配的健康人淋巴细胞中的表达情况。结果：成功建立EBV转化的淋巴母细胞系，得到了5例健康人转化淋巴母细胞，检测了E2F1、PLK1、BIRC5及PTPN11基因在5例转化的淋巴母细胞及其配对的健康人淋巴细胞中的表达情况。E2F1基因在两种细胞中均表达，与正常人淋巴细胞相比，转化细胞中E2F1的mRNA表达上调3.161倍，差异有统计学意义（P<0.05）；Western blot结果显示，与正常人淋巴细胞相比，E2F1在转化细胞中的蛋白表达上调1.850倍，差异有统计学意义（P<0.05）。PLK1基因在两种细胞中均表达，与正常人淋巴细胞相比，淋巴母细胞中PLK1的mRNA表达上调11.329倍，差异有统计学意义（P<0.001）；Western blot结果显示，与正常人淋巴细胞相比，PLK1在转化细胞中的蛋白表达上调8.140倍，差异有统计学意义（P<0.001）。BIRC5基因在两种细胞中均表达，相比正常人淋巴细胞，淋巴母细胞中BIRC5的mRNA表达上调7.921倍，差异有统计学意义（P<0.001）；Western blot结果显示，与正常人淋巴细胞相比，BIRC5在转化细胞中的蛋白表达上调2.065倍，差异有统计学意义（P<0.01）。PTPN11基因在两种细胞中均表达，与正常人淋巴细胞相比，淋巴母细胞中PTPN11的mRNA表达下调4.760倍，差异有统计学意义（P<0.05）；Western blot结果显示，在正常人淋巴细胞和转化淋巴母细胞中PTPN11的蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论：1. E2F1、PLK1及BIRC5在转化的淋巴母细胞中mRNA转录和蛋白表达均高于其在正常人淋巴细胞。2. PTPN11基因在转化的淋巴母细胞中mRNA转录低于其在正常人淋巴细胞，而蛋白表达水平在两种细胞中的差异没有显著性。