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泡沫病毒(foamy virus, FV)泛指反转录病毒科中泡沫病毒亚科的病毒,与人免疫缺陷病毒Ⅰ型(human immunodeficiency virus type1, HIV-1)和人T细胞白血病病毒(human T-cell leukemia virus, HTLV)的基因组结构类似,属于复杂的反转录病毒。泡沫病毒具有独特的进化地位、潜在的致病性及可能改建为优良的基因转移载体等特点,近年逐渐引起各国疾病防控机构及从事病毒学及免疫学基础研究学者的重视。学界对灵长类泡沫病毒的研究较为深入,对于非灵长类泡沫病毒的研究相对肤浅,主要涉及猫泡沫病毒(feline foamy virus, FFV)和牛泡沫病毒(bovine foamy virus, BFV)。我室在上世纪九十年代自主分离到一株中国株牛泡沫病毒3026(BFV strain3026, BFV3026),随之对其基因功能及其与宿主关系开展系列研究。本文以经过实验室长期培养的BFV3026为出发材料,构建多株BFV3026原病毒全长基因组DNA感染性克隆(pBS-BFV),筛选获得了高复制活性的感染性克隆(pBS-BFV-B);通过与实验室前期获得的低活性基因组全长DNA克隆(pBS-BFV-Y)进行基因嵌合比较,对影响该病毒复制活性的关键因素进行了分析：发现BFV附属蛋白BTas的反式激活的能力与pBS-BFV的复制水平密切相关；分子机制探究结果显示：其第108位氨基酸是DNA结合结构域中的关键氨基酸之一,Asp108突变为Asn显著增强BTas蛋白与Tas应答元件(Tas-responsive element, TRE)的相互作用,提高了BTas蛋白反式激活能力,是该感染性克隆具有高复制活性的主要原因；随之,使用稳定整合BFVLTR-GFP的BFV指示细胞系(BFV indicator cell line, BICL)进行了cell-freeBFV3026筛选实验,获得了cell-free BFV3026感染性病毒颗粒,滴度约为1×104TCID50/mL;最后,对病毒另一附属蛋白BBet的功能进行反向遗传学研究：证实BBet蛋白在BFV3026早期具有负调控功能。本研究获得的高活性BFV3026感染性克隆及cell-free的BFV3026毒株,为深入研究BFV3026的分子生物学特征及构建基因转移载体准备了良好的实验材料；利用反向遗传学方法,在病毒水平探索了BFV3026附属蛋白BTas和BBet在病毒复制过程中的功能,为深入解析BFV的附属基因的功能及其对复制特征影响提供了重要实验依据,提示了分析BFV潜在致病性改变可能的研究方向。相关研究结果为解析泡沫病毒独特的基因表达调控机制提供依据,为全面认识反转录病毒及相关重要致病病毒的致病机理提供新视角,同时可作为将泡沫病毒改建为基因转移载体的理论依据。