BiOX对水中卡马西平的光催化降解及其对人类皮肤角质细胞的生物效应评价

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最近,卤化氧铋(BiOX, X=Cl, Br, I)作为一类新型半导体纳米材料,因其独特的微观结构和良好的光催化性能,引起了人们的极大关注。在过去的很长一段时间中,世界水处理领域的研究重点集中在某些优先控制的污染物上,如持久性有机污染物、农药、工业化学品及重金属等。随着科技手段的不断进步,药物和个人护理用品(Pharmaceutical and Personal CareProducts, PPCPs)的产量和用量日渐增多。PPCPs作为一类新兴污染物,成为环境生物领域研究的热点和难点之一。其中卡马西平(CBZ)作为该类污染物的典型代表,很难在污水处理工艺中被完全去除,导致环境水体中的CBZ呈显著持续性特征。CBZ残留不仅对环境和生态系统产生不良影响,还可以通过食物链富集作用,对人类的健康造成持久性的危害。因而,开发针对CBZ去除技术,将对预防大量CBZ进入环境有着重要的意义。BiOX的光催化特性,可以对水体中的环境污染物进行高效降解,且不会产生二次污染,在CBZ水处理中显示出巨大的应用前景。另一方面,随着BiOX研究和应用的日益广泛,其在环境中暴露的机会越来越多,BiOX的大量暴露是否会对环境造成威胁,从而造成健康与安全方面的问题?BiOX对生物系统结构和功能的影响将最终决定其实际应用价值。然而目前为止BiOX的生物效应方面的研究还处于空白阶段,因此开展BiOX生物效应研究尤为迫切。体外细胞培养方法可以对外源化合物进行快速有效的生物效应评价,并且在揭示化合物生物效应的产生及其影响因素、微观结构分子构效和毒性机理等方面具有明显的优势。因此,在细胞水平上研究BiOX与生命体的相互作用,探讨BiOX对生命体结构和功能的影响,将为BiOX生物安全性能评价提供重要的参考依据,对BiOX材料的可持续发展有着重要的意义。基于以上考虑,本文研究了BiOX半导体纳米材料在光催化降解CBZ中的应用,并以人类皮肤角质细胞(HaCaT)为模型,研究了其生物效应,主要分为以下五个方面:1.在超声辅助下,通过二乙二醇水热合成方法,在水热温度为120°C,水热反应时间为30min的条件下,制备出了具有分等级结构的BiOCl光催化剂。在模拟太阳光下该催化剂具有良好的光催化性能,光照150min后,对CBZ的降解率达到97%,其降解速率常数是商品TiO2(P25)的9.48倍。BiOCl优异的光催化活性可归因于其疏松的分等级结构、活性面{110}暴露以及表面羟基的存在。活性物种淬灭实验表明该BiOCl的光催化活性主要源于光生空穴(h+)、羟基自由基(OH)和超氧自由基负离子(O-2)。2.系统考察了BiOCl用量、CBZ初始浓度、溶液pH值及共存无机离子对光催化降解反应的影响,并采用高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱技术分析了BiOCl光催化降解CBZ的中间产物和降解途径。结果表明,光催化降解CBZ的最佳实验条件为wBiOCl=0.8g·L-1,pH=4,光催化效率随着CBZ浓度的降低而升高;共存阴离子(Cl、NO3和HCO3)对体系的影响不明显,而共存阳离子(Mg2+、Ca2+和Al3+)的存在普遍降低了BiOCl光催化反应速率。同时,降解途径表明BiOCl可有效降解CBZ,没有毒副产物的蓄积。3. BiOCl的研究和应用的增加可能对环境和人体健康带来不利的影响,但其毒理学资料仍然缺乏。我们应用HaCaT细胞,首次研究了BiOCl纳米片的生物效应。在BiOCl浓度达到0.5μg·mL-1没有观察到显著的毒性。然而在高浓度时,BiOCl通过诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞表现出浓度依赖的细胞毒性。通过流式细胞仪和透射电镜发现BiOCl可以进入细胞,并停留在溶酶体、线粒体、细胞核和囊泡中。DCF荧光测定和抗氧化剂N-乙酰基半胱氨酸(NAC)实验表明BiOCl的细胞毒性与细胞内活性氧的积累有关。4.我们应用HaCaT细胞首次比较了BiOBr纳米片和TiO2纳米颗粒在暴露24小时后的细胞毒性。结果表明,相比TiO2,BiOBr对细胞活性和亚细胞器结构的影响较小。BiOBr主要造成细胞的晚期凋亡,TiO2则是通过早期凋亡和晚期凋亡两种方式造成了细胞的死亡,从而造成了较为明显的细胞周期阻滞。TiO-12暴露量为10μg·mL时,细胞颗粒度相比BiOBr暴露增加了两倍;BiOBr和TiO2暴露均使细胞内活性氧增加,相比正常细胞,BiOBr和TiO2暴露组细胞内的ROS含量分别是对照组细胞的2倍和2.7倍。这种不同的细胞内摄量和活性氧聚集导致了二者不同的毒理学表现,使BiOBr显示出比TiO2更好的生物安全性。5.在对BiOCl生物效应的进一步研究中,我们发现BiOCl的形貌和表面性质对细胞毒性有着至关重要的作用,片状BiOCl主要以直接的物理接触的方式损伤细胞膜,而球状具有丰富表面羟基的BiOCl主要造成细胞氧化应激。这两种不同的细胞毒性机制均造成了细胞活性的下降,然而其死亡模式大不相同,前者主要为晚期凋亡;而后者造成了明显的线粒体膜电位(MMP)下降,细胞主要由于早期凋亡造成了细胞的死亡,并伴有少量晚期凋亡发生。对于BiOCl理化特性与细胞毒性之间关系的研究对于制备出更加安全有效的BiOCl光催化剂具有重要的指导意义。
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