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目的：本研究确认中国阿尔茨海默病（AD）人群外周血中糖酵解相关基因的甲基化水平与AD发生、发展中的作用。分析阳性基因PFKFB3、DLD、GAPDHS、LDHB、PKLR、LDHC、HK3和ALDOC启动子区甲基化对阿尔茨海默病的潜在诊断价值，以及联合不同基因能否提高对AD的诊断价值。
方法：选取2015年-2016年在宁波市第一医院、宁波大学附属医院和宁波市康宁医院就诊的AD患者64例，同时收集年龄匹配且无痴呆家族史的正常对照61例，对他们的基线资料和实验室检查结果进行列表登记。于清晨抽取他们的空腹血液，用磁珠法提取DNA，通过亚硫酸氢盐转化后，再用实时荧光定量PCR的方法检测PFKFB3、DLD、GAPDHS、LDHB、PKLR、LDHC、HK3和ALDOC基因启动子区域的CpG岛甲基化率，运用秩和检验分析8个候选基因的甲基化水平在AD组和对照组之间的甲基化水平，再用ROC曲线评估8个基因甲基化水平预测AD发病的效果。采用双荧光素酶实验探究目的基因片段能否调控基因表达。
结果：我们的结果显示，与对照组相比，AD组的PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、LDHC和HK3的甲基化水平显著提高(P均＜0.05)，中位数和四分位数分别为84.87（45.97-122.30）vs.6.77（3.00-15.84）；5.43（4.09-7.57）vs.0.34（0.23-0.56）；0.09（0.07-0.10）vs.0.05（0.03-0.07）；0.21（0.17-0.30）vs.0.13（0.08-0.18）；2.80（2.16-3.47）vs.1.62（1.10-2.22）；0.27（0.23-0.33）vs.0.15（0.10-0.24）。而PKLR的甲基化水平则是在AD组低于对照组（P=2.68E-18），中位数和四分位数分别为0.09（0.07-0.10）vs.0.47（0.25-0.70），此外DLD的甲基化水平在AD组和对照组之间无统计学差异。ROC曲线显示PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、LDHC和HK3高甲基化对于AD均有一定的诊断价值，可作为潜在的AD诊断生物标志物，且GAPDHS的诊断效果最好（AUC分别为0.909、0.958、0.829、0.776、0.779和0.777）。用双荧光素酶报告基因测定评估PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、PKLR、LDHC和HK3的靶区域的功能活性。除了LDHC外，插入另外六种基因启动子片段都能够显着增加荧光素酶表达水平（P=0.00002，P=1.39E-7，P=0.0002，P=0.0003，P=0.001，P=0.000036）。
结论：PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、LDHC和HK3甲基化在AD组高于对照组，PKLR则是在AD组低于对照组，外周血中PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、LDHC和HK3高甲基化可作为AD的潜在诊断生物标志物，且PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、PKLR和HK3目的片段具有启动功能。
方法：选取2015年-2016年在宁波市第一医院、宁波大学附属医院和宁波市康宁医院就诊的AD患者64例，同时收集年龄匹配且无痴呆家族史的正常对照61例，对他们的基线资料和实验室检查结果进行列表登记。于清晨抽取他们的空腹血液，用磁珠法提取DNA，通过亚硫酸氢盐转化后，再用实时荧光定量PCR的方法检测PFKFB3、DLD、GAPDHS、LDHB、PKLR、LDHC、HK3和ALDOC基因启动子区域的CpG岛甲基化率，运用秩和检验分析8个候选基因的甲基化水平在AD组和对照组之间的甲基化水平，再用ROC曲线评估8个基因甲基化水平预测AD发病的效果。采用双荧光素酶实验探究目的基因片段能否调控基因表达。
结果：我们的结果显示，与对照组相比，AD组的PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、LDHC和HK3的甲基化水平显著提高(P均＜0.05)，中位数和四分位数分别为84.87（45.97-122.30）vs.6.77（3.00-15.84）；5.43（4.09-7.57）vs.0.34（0.23-0.56）；0.09（0.07-0.10）vs.0.05（0.03-0.07）；0.21（0.17-0.30）vs.0.13（0.08-0.18）；2.80（2.16-3.47）vs.1.62（1.10-2.22）；0.27（0.23-0.33）vs.0.15（0.10-0.24）。而PKLR的甲基化水平则是在AD组低于对照组（P=2.68E-18），中位数和四分位数分别为0.09（0.07-0.10）vs.0.47（0.25-0.70），此外DLD的甲基化水平在AD组和对照组之间无统计学差异。ROC曲线显示PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、LDHC和HK3高甲基化对于AD均有一定的诊断价值，可作为潜在的AD诊断生物标志物，且GAPDHS的诊断效果最好（AUC分别为0.909、0.958、0.829、0.776、0.779和0.777）。用双荧光素酶报告基因测定评估PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、PKLR、LDHC和HK3的靶区域的功能活性。除了LDHC外，插入另外六种基因启动子片段都能够显着增加荧光素酶表达水平（P=0.00002，P=1.39E-7，P=0.0002，P=0.0003，P=0.001，P=0.000036）。
结论：PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、LDHC和HK3甲基化在AD组高于对照组，PKLR则是在AD组低于对照组，外周血中PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、LDHC和HK3高甲基化可作为AD的潜在诊断生物标志物，且PFKFB3、GAPDHS、LDHB、ALDOC、PKLR和HK3目的片段具有启动功能。