论文部分内容阅读
水稻作为我国主要的粮食作物,在我国粮食安全中有着举足轻重的作用。水稻还是重要的模式作物,至今已有众多关于水稻的科学研究成果被报道。由稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是水稻的三大病害之一,且颈瘟对水稻的产量影响最为严重。培育抗稻瘟病品种是防治稻瘟病最经济环保的方法。截止目前为止,已报道的稻瘟病抗性基因超过100个,其中已有24个稻瘟病抗性基因被克隆。蜀恢498是本课题组选育的具有穗大,抗倒伏,配合力高,株型理想杂交水稻强恢复系,已配组十余个杂交水稻新品种,在生产上大面积推广。随着稻瘟病生理小种的变化,蜀恢498的稻瘟病抗性表现出下降趋势。R1088和HB542是经过本课题组多年多点稻瘟病鉴定具有明显颈瘟抗性的材料。本研究通过蜀恢498与抗病亲本多代回交和田间抗性选择的方法,利用这两个抗病材料改良蜀恢498的抗性,并期望通过基因芯片技术获得颈瘟抗性的相关QTLs。主要的研究结果如下：1、选取实验室提供的4份性状优良的水稻材料,以强恢复系蜀恢498为对照进行多态性引物筛选,进行田间穗颈瘟抗性鉴定,并筛选稻瘟病抗性材料。结果显示：选取均匀分布在水稻12条染色体上的SSR引物277对,其中具有多态性的引物有97对。PCR产物用3%琼脂糖凝胶电泳检测,检测结果显示：多态性标记占比为35%,无多态性的标记共180对,占总数的百分比为65%。稻瘟病抗性鉴定表明：青谷梅3号,水源290,R1088, HB542的穗颈瘟抗性明显优于蜀恢498。2、为了解这4份水稻抗稻瘟病材料和蜀恢498中的抗病基因分布情况,设计10对引物鉴定8个稻瘟病抗性。实验结果表明：蜀恢498中含抗病基因Pid3,Pizt,Pi5,Pi9的同源片段；水源290中含抗病基因Pid3, Pib, Pizt, Pi9的同源片段；R1088含抗病基因Pid3, Pi5, Pita的同源片段；青谷梅3号含抗病基因Pid3, Piz, Pi9, Pigm, Pita的同源片段；HB542含抗病基因Pid3, Pib, Pi9, Pita的同源片段。这些数据将为改良蜀恢498的抗病和定位新的抗病基因提供参考。3、将R1088和HB542作为供体亲本、蜀恢498作为受体亲本杂交,经过连续4代回交,然后自交,通过颈瘟田间抗性鉴定筛选到蜀恢498的近等基因系蜀恢498NILR1088和蜀恢498 NILHB542。采用Rice SNP9K基因芯片测序技术,确认了蜀恢498NILR1088和蜀恢498 NILHB542的代换片段。结合dCAPS标记排除非抗病片段,最终将抗病片段定位在R1088的第10号染色体R8HindⅢ到RM25122间约为2.1Mb的染色体片段,HB542的12号染色体的dCAPS引物H10EcoRⅠ与H12HindⅢ之间约为2.6Mb的染色体片段。