双氢青蒿素提高人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤化疗敏感性的实验探讨

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目的:探讨双氢青蒿素(DHA)对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP的化疗敏感性及抗凋亡抑制蛋白XIAP表达的影响。方法:体外培养SKOV3/DDP细胞株至对数生长期后制成细胞悬液5×106个,接种于缺乏细胞免疫力的BALB/c裸鼠腋窝下,待裸鼠皮下种植瘤体积达500mm3-1000mm3时即建模成功,将20只裸鼠分4组:空白组、顺铂(2mg/kg)组、低剂量DHA(100mg/kg)+顺铂组、高剂量DHA(200mg/kg)+顺铂组,顺铂组隔天腹腔注射给药,双氢青蒿素联合顺铂组每天按时灌胃及隔日腹腔给药,并记录裸鼠体质量曲线,10日后将裸鼠脱臼处死,称瘤体重量,计算各组裸鼠移植瘤抑瘤率,RT-PCR检人卵测巢癌耐药移植瘤中XIAP mRNA表达,免疫学组织化学染色方法检测XIAP蛋白表达。结果:1.病理观察:癌组织中实质细胞居多,体积大,且排列紊乱,核浆比例增大,DHA联合顺铂组肿瘤细胞中出现不同程度的核固缩、核碎裂等凋亡现象,且有纤维结缔组织增生。2.DHA对移植瘤增长产生明显的抑制,并依赖用药浓度,低、高DHA联合组所测抑瘤率为:28.42%及51.91%,较空白及顺铂组有差异,P<0.05。3.经RT-PCR及SP法检测均证实:空白组及顺铂组无统计学意义,P>0.05,DHA联合顺铂组XIAP基因及蛋白表达均较对照组减少,P<0.05,且与DHA浓度呈负相关。结论:双氢青蒿素对裸鼠皮下移植瘤具有逆转耐药的作用;双氢青蒿素联合顺铂组的抑瘤率较空白组及顺铂组明显增加,提示双氢青蒿素可提高肿瘤细胞对顺铂的敏感性;双氢青蒿素联合顺铂组XIAP的表达较对照组及顺铂组明显减少,证实双氢青蒿素通过促进细胞株凋亡逆转化疗耐药,可能机制与凋亡相关。
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