【摘 要】
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在印度传统医药中,黄梁木树皮与姜黄根、黄荆叶联合用于治疗癌症。姜黄中的姜黄素以及黄荆中的萜类物质都已有诸多研究表明具有良好的抗肿瘤效果,而黄梁木中抗肿瘤活性成分的研究却不多。为了探明黄梁木树皮抗肿瘤的物质基础,本研究首先对12个不同种源样品的5个不同极性溶剂粗提物进行体外抑制MCF-7乳腺癌细胞实验,发现使用超声方法提取的黄梁木树皮乙酸乙酯提取物对抑制MCF-7乳腺癌细胞的药效比其它溶剂粗提物好,
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在印度传统医药中,黄梁木树皮与姜黄根、黄荆叶联合用于治疗癌症。姜黄中的姜黄素以及黄荆中的萜类物质都已有诸多研究表明具有良好的抗肿瘤效果,而黄梁木中抗肿瘤活性成分的研究却不多。为了探明黄梁木树皮抗肿瘤的物质基础,本研究首先对12个不同种源样品的5个不同极性溶剂粗提物进行体外抑制MCF-7乳腺癌细胞实验,发现使用超声方法提取的黄梁木树皮乙酸乙酯提取物对抑制MCF-7乳腺癌细胞的药效比其它溶剂粗提物好,进而优化了该方法的提取条件;建立了黄梁木树皮乙酸乙酯粗提物的UPLC-MS分析方法,对12个不同种源样品的UPLC-MS指纹图谱和抗肿瘤药效进行了研究,通过谱效关系推测出UPLC-MS指纹图谱中与抗肿瘤活性相关的峰,对其中两个在样品间差异显著且含量较高的峰进行分离纯化、药效验证和抗肿瘤机制的初步研究,主要结果如下:对12个样品的粗提物进行MCF-7乳腺癌细胞抑制实验,发现不同样品间的化学信息和药效均差异明显,药效作用排序为:S9>S12>S8>S7>S5>S10>S1>S6>S4>S2>S3>S11,对指纹图谱做聚类分析,结果大致呈现出药效不同的指纹图谱被归到不同类中。采用相关分析法和偏最小二乘法将指纹图谱的“谱”与药效评价指标的“效”联合起来建立谱效关系,不同分析方法呈现出基本一致性的结果,1号峰、2号峰、4号峰、6号峰、7号峰、8号峰、17号峰、18号峰、19号峰对体外细胞毒性具有重要作用,结合UPLC-MS上的各物质特征离子质荷比及相关文献报道推测出部分有效物质中包含β-谷甾醇、奎诺酸,卡丹宾,3α-二氢卡丹宾,3α-异二氢卡丹宾。采用制备液相分离12个样本间差异显著且含量较高,并且与抗肿瘤作用相关的6、7号峰,纯化的6、7号峰化合物通过高分辨质谱鉴定,确定6号峰主要成分为3α-异二氢卡丹宾,7号峰主要含3α-二氢卡丹宾,两个样品对MCF-7细胞毒作用上也呈现了一定的差异性,结果表明,3α-二氢卡丹宾对MCF-7没有细胞毒作用,但对MCF-7/ADR阿霉素耐药株表现出良好的逆转耐药作用,3α-异二氢卡丹宾对MCF-7有细胞毒性,却没有表现出逆转耐药作用。综上所述:通过谱效关系辨识出黄梁木树皮乙酸乙酯提取物中与抑制MCF-7乳腺癌细胞效果相关性最大的9个峰,其中分离纯化的3α-异二氢卡丹宾与3α-二氢卡丹宾对癌细胞表现出不同的作用机制,本研究初步揭示了黄梁木树皮的抗肿瘤作用的物质基础,为黄梁木抗肿瘤药物的研发提供理论依据。
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