【摘 要】
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土壤盐碱化是制约植物生长发育和作物产量的关键因子。因此,寻找和发掘植物抗盐基因对作物抗逆遗传改良具有重要理论意义和应用价值。MYB转录家族是植物体内数量最大、功能最
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土壤盐碱化是制约植物生长发育和作物产量的关键因子。因此,寻找和发掘植物抗盐基因对作物抗逆遗传改良具有重要理论意义和应用价值。MYB转录家族是植物体内数量最大、功能最多样的转录因子之一,广泛参与植物生长发育和环境胁迫响应的调控。已有报道表明MYB4基因参与植物抗旱,抗寒及UV-B防御的调控,然而,其在盐胁迫响应中的作用尚不清楚。本研究证实了MYB4基因参与植物盐胁迫响应的调控,主要研究结果如下:1、利用RT-qPCR方法分析,发现MYB4基因在100 m M NaCl诱导1h转录水平达到最高,然后逐渐降低,表明MYB4基因被盐胁迫诱导表达。2、在100m M和150m M NaCl胁迫下,突变体myb4-1对盐胁迫敏感,而过MYB4表达植株对盐胁迫耐受,表明MYB4在调控植物盐胁迫中起十分重要的作用。3、在甘露醇,ABA,氯化钾和氯化锂处理下,突变体myb4-1的生长表型与野生型无明显差异,表明MYB4基因功能缺失突变体对盐胁迫高度敏感主要由体内Na~+毒害造成的。4、钠钾含量分析显示,myb4-1突变体根中Na~+含量显著高于野生型根中Na~+含量,但是突变体叶子中的Na~+含量与野生型的无明显差别;过表达植株根中Na~+含量与野生型根中Na~+含量无显著差别,但在叶中Na~+含量比野生型根中高。由此推测,转录因子MYB4可能参与调节了Na~+的积累和区域化过程。5、进一步利用q RT-PCR分析盐胁迫相关基因的表达,结果表明,NaCl胁迫处理后myb4-1突变体中SOS1,SOS2,SOS3,HKT1和NHX4基因的转录水平较野生型显著降低,而过表达植株中这些基因的表达与野生型相比显著提高。说明MYB4基因可能通过激活SOS信号传导途径,促使一部分钠离子外排,另一部分钠离子进入到木质部,通过转运蛋白HKT1,被木质部薄壁细胞储存,以及通过定位在液泡膜上的转运蛋白NHX4将钠离子储存在液泡里,从而增加植物抵抗高盐毒害。6、进一步利用烟草瞬时表达实验分析MYB4与SOS1,SOS2,SOS3,HKT1和NHX4的关系,发现转录因子MYB4可能激活SOS1,SOS3,HKT1和NHX4的表达。7、通过染色质免疫共沉淀(ChIP)实验发现,MYB4在SOS1启动子区有3个结合位点;在SOS3启动子区有1个结合位点;在HKT1启动子区有1个结合位点;在NHX4启动子区有1个结合位点。表明MYB4可能通过直接靶定在SOS1,SOS3,HKT1和NHX4启动子上激活它们的表达从而提高植物对盐的耐受性。以上研究结果表明,转录因子MYB4可能通过SOS信号转导途径以及HKT1和NHX4的储存机制影响Na~+的分布进而提高植物对盐胁迫的耐受性。
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