研究背景:单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)在全球广泛分布,发展中国家,30岁以上人口的感染率达到80%。HSV主要通过破损的粘膜组织进入人体,并可潜伏于神经组织,造成周期性感染。HSV-1主要感染口腔,唇,脸,眼睑部位;HSV-2主要感染生殖器粘膜,两种病毒也可以交叉感染。目前治疗疱疹病毒感染的药物主要是阿昔洛韦,但临床上耐药株的不断出现迫使人们寻找新的抗病毒靶点,研发新的抗病毒药物。实验目的:从余甘子的15种提取物中筛选出最佳的抗病毒化合物,寻找新的抗病毒靶点。研究内容与结果:用MTT的方法检测了15种余甘子提取物对Vero细胞的药物毒性,最大无毒浓度范围是62.5μM到500μM,药物毒性较低。CPE法观察15种提取物对阿昔洛韦敏感株HSV-1(F)的抗病毒活性,从中选出4种抗病毒效果较理想的提取物,完全抑制病毒的浓度分别为250μM,250μM,62.5μM,62.5μM。检测四种提取物对三种耐药株HSV-1(106),HSV-1(153),HSV-1(blue)的抗病毒效果,其中异柯里拉京抗耐药株的效果最好,在浓度为300μM时可以完全抑制病毒的感染。空斑减数实验研究异柯里拉京抗病毒的作用方式,发现其综合抗病毒作用,直接灭活病毒作用,抑制病毒吸附和感染后治疗作用显著,在浓度为200或250μM时可完全抑制病毒空斑形成;抑制穿刺作用不明显,用异柯里拉京预处理细胞,没有预防病毒感染的效果。用原子力显微镜观察异柯拉里京灭活后的病毒,发现病毒颗粒的高度比对照组小,说明异柯里拉京可能破坏了病毒的囊膜,从而使病毒失去了感染能力。异柯里拉京对病毒有显著的治疗作用,分别从DNA复制,RNA转录,蛋白翻译三个层面来检查药物对病毒的影响。实验显示异柯里拉京对HSV-1耐药株立即早期基因转录,立即早期、早期的蛋白合成没有影响,但可以显著抑制病毒的DNA复制,早期、晚期基因的转录和晚期蛋白的聚集,从而到达抗病毒的效果。研究意义:异柯里拉京对病毒的抑制效果是多方面的不仅可以抑制病毒DNA的复制还可以直接灭活病毒,阻止病毒的吸附,是一种潜在的抗病毒药物。