不同绵羊品种BMP-15基因的SNPs和mRNA及其与产羔性状的相关性分析

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:wohao1025
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本研究采用PCR-SSCP技术和测序技术相结合的方法对不同品种的绵羊BMP-15基因两个外显子分别进行SNPs检测及其和产羔性状之间的关联分析;并采用实时荧光定量PCR技术对BMP-15基因在绵羊不同组织中m RNA的表达量与产羔性状进行关联性分析。为进一步研究BMP-15基因对绵羊产羔性状和繁殖力的影响提供参考资料。主要研究结果如下:1.绵羊BMP-15基因CDS区外显子Ⅰ多态性及其产羔性状的相关性分析以产单羔蒙古羊母羊、产双羔蒙古羊母羊、产单羔甘肃高山细毛羊母羊、产双羔甘肃高山细毛羊母羊和小尾寒羊多羔母羊3个不同品种的5个群体为研究对象,采用PCR-SSCP技术与测序相结合的方法,检测BMP-15编码区67和92两位点在5个绵羊群体内是否存在Fec XH突变及Fec XI突变,再依照检测结果与产羔性状进行关联分析。结果表明,在三个品种中既未检测出与Inverdale绵羊相同的Fec XI突变,也未检测出与Romney绵羊相同的Fec XH突变,从而预测BMP-15基因影响Romney与Inverdale绵羊产羔性状的SNP位点均未影响上述绵羊品种的产羔性状。2.绵羊BMP-15基因第二外显子的多态性及其与产羔性状的相关性分析在蒙古羊单、双羔母羊,高山细毛羊单、双羔母羊和小尾寒羊多羔母羊5个类群中采用PCR-SSCP技术结合DNA测序的方法检测BMP-15基因第二外显子中第747(T747→C)、755(T755→C)两个位点在5个绵羊类群的多态性,并将其与三个绵羊品种的产羔性状进行关联分析。研究结果表明:(1)总共检测出三种不同的基因型即野生纯合型AA、突变杂合型AB、AC,在检测的5个类群中AA型均为优势基因型,A基因为优势等位基因;(2)在甘肃高山细毛羊中上述基因型均被检测到,而蒙古羊和小尾寒羊群体中未检测到AB型(T747→C);(3)在蒙古羊群体中,发生T755→C杂合突变的个体其平均产羔数显著高于野生纯合型,突变型比野生纯合型多0.27只(P<0.05);(4)在三个品种中,双羔母羊和多羔母羊群体的AC基因型频率均高于单羔母羊。根据以上试验结果可初步预测:发生在BMP-15编码区第755位点的T→C突变(AC型)对蒙古羊产双羔率影响十分显著,这说明该位点有可能是影响蒙古羊产羔性状的一个潜在SNP位点。3.绵羊BMP-15基因在不同产羔性状母羊组织中的相对表达量差异及分析利用实时荧光定量PCR的方法,分别在蒙古羊、小尾寒羊、无角陶赛特羊三种绵羊母羊的下丘脑、垂体、肾脏、心脏、卵巢五个组织中检测BMP-15基因转录m RNA的相对表达量差异。结果表明,(1)BMP-15基因集中表达在蒙古羊双羔母羊和无角陶赛特羊双羔母羊的肾脏和卵巢组织中,且肾脏组织中的表达量与卵巢组织存在显著差异(P<0.05),而在其余器官中该基因的相对表达量很低;在小尾寒羊多羔母羊中,BMP-15转录的m RNA集中表达在心脏、肾脏和卵巢三个组织当中,其余器官的相对表达量很低;(2)在无角陶赛特羊和蒙古羊两个品种中,该基因m RNA在卵巢中的表达量双羔母羊显著高于单羔母羊(P<0.05),其卵巢组织中的相对表达量小尾寒羊多羔母羊显著高于蒙古羊单、双羔母羊(P<0.05)。这说明该基因转录的m RNA在不同产羔性状的绵羊卵巢组织中存在显著差异,据此推测:(1)BMP-15基因在转录水平对于绵羊产羔性状有显著的影响。(2)BMP-15基因可能是影响以上三个品种绵羊高产的候选基因之一。
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