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目的:建立一种切实可行的胚胎大鼠背根神经节神经元培养及纯化方法,研究MEF2C在背根神经节神经元细胞内表达对P物质和低分子量神经丝微管蛋白基因表达的影响以及MEF2C与气道高反应性发生间可能的关系。方法:利用显微解剖获取足够数量的胚胎大鼠背根神经节,通过胰蛋白酶+EDTA消化、交替使用NB培养基与加入了5-氟-2-脱氧尿嘧啶核苷酸/尿苷的抗有丝分裂NB培养基等方法在体外获得纯化的背根神经节神经元,采用神经丝蛋白免疫细胞化学染色法与DAPI染核的方法鉴定并测定神经元的纯度。分离培养背根神经节神经元细胞,然后暴露于不同浓度的NGF下24小时,最后用实时聚合酶链反应技术检测P物质与低分子量神经丝微管蛋白基因在背根神经节神经元细胞内的表达。通过化学转染方法将合成的3条siRNA-Mef2c分别转染PC12细胞,并用实时聚合酶链反应技术筛选转染效率最高的siRNA。采用化学转染方法干扰背根神经节神经元细胞内MEF2C的表达,在高浓度神经生长因子刺激背根神经节神经元细胞后采用实时聚合酶链反应技术检测干扰后背根神经节神经元细胞内P物质与低分子量神经丝微管蛋白基因的表达。结果:1、获得的背根神经节神经元在体外生长良好,纯度可达到96%以上。2、P物质及低分子量神经丝微管蛋白基因表达随刺激用神经生长因子浓度的升高而升高。3、使用化学转染方法成功的干扰了背根神经节神经元细胞内MEF2C的表达,Mef2c较对照组下降50%,同时没有检测到对Creb表达的影响。实验组背根神经节神经元细胞内P物质在RNA水平较对照组下降了41%,而低分子量神经丝微管蛋白在RNA水平较对照组下降了61%。结论:1、本实验原代培养方法能获得大量高度纯化的大鼠背根神经节神经元。2、神经生长因子促进大鼠脊髓背根节感觉神经元内P物质与低分子量神经丝微管蛋白的合成。3、胚大鼠背根神经节神经元细胞内P物质及低分子量神经丝微管蛋白基因表达受到MEF2C的调控,MEF2C可能是参与了气道高反应性发生的关键转录因子。